支原体 一位骨灰级研究员的分享：如何有效祛除支原体！

为什么有些细胞实验不能重复？

为什么有些细胞不能长时间保持最佳状态？

为什么实验室里不止一个细胞？

细胞生长缓慢，细胞变形，碎片增多，悬浮细胞易聚集，培养基早期变色，显微镜下有小黑点...

如其他试剂选择不当、细胞系老化、细菌污染等原因。排除了，但仍有一种或多种上述情况，强烈建议您的细胞可能被支原体污染！

图。电镜下支原体

支原体污染很普遍

据美国统计，细胞中支原体污染的概率在70%以上。同时，由于支原体的直径较小，仅在180 nm到350 nm之间，只能用电子显微镜才能看到，不易被实验者肉眼检测到，因此支原体污染逐渐成为一个普遍问题。

支原体污染的危害

支原体污染是一个渐进的过程，常用抗生素无效。所以，相信所有的实验者都已经了解到支原体污染有多讨厌了。

1.细胞条件差，生长速度慢，实验无法推进。

2.细胞内DNA、RNA、蛋白质的表达发生变化，影响实验结果，导致实验数据不准确，浪费时间和金钱。

3.一个被污染的细胞成为实验室的污染源，对工作区、培养箱、液氮罐造成污染，进而污染其他细胞，造成其他细胞二次污染，影响实验，数据无法重复，无法出预期结果。

如何有效地将支原体赶出细胞？

发现细胞被支原体污染，花了很多时间扩大，或者做了基因转染、体外刺激等大量工作处理，怎么办？由于前期工作量巨大，不能丢弃已有的细胞。但由于价格原因，昂贵的试剂无法用于杀灭细胞上的支原体。同时，实验者还需要去除细胞上的支原体污染，才能将实验推向前进，最终获得准确的实验数据。

实验者可以选择对支原体有特异作用的抑制剂，前期处理细胞，中期加药，逐渐培养4代左右，彻底清除支原体污染，保证实验顺利进行，使结果准确。这种试剂全世界都有，郑伟翔宇生物周围的实验人员也做了很多尝试，其中德国密涅瓦公司的ZellShield去除剂效果最确切，性价比最高。

Zellshield是一种新型复合抗生素，副作用极低，能有效去除细胞培养中的支原体、细菌和真菌污染。zellshield使用简单，可以直接加入培养基中保护细胞。

其原理是通过抑制支原体增殖中某一蛋白质的合成来抑制新支原体的增殖。它是一种新型复合抗生素。广泛应用于与细胞培养相关的科研和工业领域。

特征

1.应用范围广

普通细胞培养和原代细胞培养

2.无细胞毒性

目前zellshield对很多细胞系没有细胞毒性。

3.高效广谱

去除支原体效果明显，还能有效防止细胞内外革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、病原昆虫和真菌的污染。

4.易操作的

可直接加入预处理的培养基或细胞中消毒。

5.高稳定性

在潜伏期，泽尔希尔德始终保持稳定的活动。

6.耐药性风险低

精心挑选的新型复合抗生素耐药风险非常低，几种抗生素联合使用几乎不会产生耐药突变株。

操作步骤:

第一步:发现98%的支原体污染发生在细胞间隙。因此，首先要将细胞消化，放入离心管中，悬浮洗涤，离心，丢弃三次。此时细胞内的支原体大部分可以被去除，为进一步加药抑制做好了准备。

第二步:在培养基中加入1% ZellShield，细胞正常培养。新支原体的增殖受到抑制，旧支原体随着细胞液的变化而逐渐减少。经过4代左右的培养，细胞中的支原体基本上可以完全消除。

注意:使用ZellShield时，不需要链霉素。

试剂费用2200元/50ml左右，可以保证大量细胞实验的顺利进行。

总之，支原体污染经常发生在细胞培养中。有时危害会在实验中造成很大的损失。支原体污染应经常检测，及时消除，使细胞在健康安全的环境中生长，为获得准确的实验结果打下良好的基础。

附件:关于德国密涅瓦公司

Minerva Biolabs GmbH是世界著名的微生物污染控制公司，尤其是支原体和军团菌的技术和产品，在世界上遥遥领先。公司总部位于德国柏林，专注于微生物污染检测和去除产品的研发和销售。

维安-佐贺是德国密涅瓦公司十年来在中国的独家合作伙伴，被国内生物学界誉为“值得持续信任的优秀供应商”。对于国内很多科研机构和生物制药，我们可以为去除支原体污染提供高效的保护。同时，我们可以为国内细胞培养实验室提供优质可靠的进口血清，为其提供坚实有力的试剂支持。