一、生化试剂的分类
一个
根据化学性质分类
1.酶类:包括alt、ast、ALP、ACP、r-gt、α-hbdh、LDH、CK、CK-MB、α-Amy、MSO、ada、che等。
2.底物/代谢产物:包括TG、TC、HDL-c、LDL-c、ua、尿素、Cr、Glu、TP、ALB、t-bil、TBA、NH4+、CO2等。
3.无机离子:包括钙、磷、镁、氯等。
4.特殊蛋白:包括apoal、apob、LP (a)、C3、C4、PFB(B因子)、IgG、IgA、IgM等。
2
根据临床应用进行分类
1.无机离子:包括钙、磷、镁、氯等。
2.肝功能:包括ALT、AST、r-GT、ALP、MSO、T-Bil、D-Bil、TBA、TP、Alb等。
3.肾功能:UA、尿素、Cr等。
4.心肌酶谱:CK、CK-MB、乳酸脱氢酶、α-HBDH、AST、MSO。
5.糖尿病:GLU等。
6.前列腺疾病:ACP、p-ACP等。
7.胰腺炎:α-AMY。
8.血脂:TC，TG，HDL-C，LDL-C，apoA1，apoB，Lp(a)。
痛风:UA。
10.有机磷中毒:ChE。
11.免疫疾病:C3，C4，pfb(b因子)，IgG，IgA，IgM，κ链，λ链。
二、反应速度特征
根据反应速度，可分为终点试剂和动力学试剂。动力学试剂可分为零级动力学方法和一级动力学方法。
一个
终点试剂
终点法是指经过一段时间(通常是几分钟)后，所有的底物(被测物质)都转化为产物，称为终点法，或者更确切地说是平衡法，是最理想的分析类型。参见图(1)。
整个反应达到平衡。由于正向反应的平衡常数非常大，可以认为所有的分析物都已经转化为产物，反应溶液的吸光度不再增加(或减少)，吸光度的增加(或减少)程度与分析物的浓度成正比。
终点法对反应条件(如酶量、pH、温度)的微小变化不敏感，只要这种变化在一定时间内不影响反应的平衡，就是最理想的反应模型。
属于终点法的试剂主要包括:
TG，TC，HDL-C，LDL-C，UA，Glu，TP，Alb，T-Bil，D-Bil，Cr(氧化酶法)，NH4+，CO2，Ca，p，Mg，Cl，apoA1，apoB，Lp(a)，C3，C4，PFB(B
2
动力学试剂
1.零阶动力学方法
零级动力学方法是指反应速度保持恒定，在反应过程中达到最大，与底物浓度无关。因此，在整个反应过程中，反应物可以以恒定的速度产生一定的产物，导致被测溶液的吸光度在一定波长下均匀减少或增加。下降或上升的速度(△A/min)与被测物的活性或浓度成正比，主要用于酶活性的测定。见图(2)。
事实上，因为底物浓度不能足够大，随着反应的进行，底物消耗到一定程度后，反应速度不会保持不变，从开始反应到达到最大速度需要一段时间。所以零级动力学法是针对特定时间的，每个试剂供应商对这个时间都有严格的规定。
属于零级动力学方法的试剂主要包括:
ALT、AST、ALP、ACP、r-GT、α-HBDH、LDH、CK、CK-MB、α-AMY、MSO、ADA、ChE、TBA等。
2.一阶动力学方法
在一定的反应时间内，反应速度与底物浓度的一级成正比。由于底物不断消耗，整个反应速度不断降低，说明吸光度增加(或减少)的速度越来越小。这种反应需要很长时间才能达到平衡。理论上可以随时监控。但由于血清成分复杂，反应开始时反应复杂，杂七杂八的反应很多。需要经过一段时间的延迟才进入稳定反应期。见图(3)。
在固定的时间间隔内，底物浓度的变化与底物的初始浓度成正比，与一级反应相同。在此期间，吸光度的增加或减少与被测物质的浓度成正比。
属于一级动力学方法的试剂主要有铬(苦味酸法)和尿素(紫外监测法)
三、色彩发展的原则
显色系统主要包括以下类型:
NAD-NADH和NADP-NADPH系统
核电厂和核电厂系统
H2O2耦合指示系统
抗原抗体反应指示系统
其他颜色反应
一个
NAD-NADH和NADP-NADPH系统
NADH和NADPH在340nm处有特征吸收峰，而NAD和NADP在340nm处无特征吸收峰。通过使用它们的偶联脱氢酶(工具酶)反应，可以根据340纳米处吸光度的变化来确定物质的浓度或活性。
乳酸脱氢酶、MDH酶、GLDH酶和G6PDH酶通常用作该指标体系中的参考酶
目前该指标体系测定的临床项目包括ALT、AST、CK、LDH、CK-MB、α-HBDH、Glu、尿素、NH4+、CO2等。
2
核电厂和核电厂系统
对硝基苯酚和对硝基苯酚在405纳米处有特征吸收峰。根据405nm处吸光度的变化，可以确定物质的浓度或活性。
目前，ALP、ACP、r-GT、AMY等都是该指标体系衡量的临床项目。
三
H2O2耦合指示系统
H2O2在过氧化物酶的作用下，可以将单一或一对无色色素氧化成有色色素，导致在一定波长下吸光度增加，因此可以用来测定物质的浓度或活性
本指标体系中使用的单一颜料为TMB、ABTS等。成对颜料包括苯酚、4AA、MBTH和DMA。
目前，TC、TG、HDL-C、LDL-C、Glu、Cr、UA等是该指标体系衡量的临床项目。
四
抗原抗体反应指示系统
特异性抗体在相应的缓冲环境中与抗原(待测物质)发生反应，生成抗原抗体复合物，形成一定的混浊度，导致特定波长处透光率的变化。在抗体过剩的前提下，变化程度与抗原浓度成正比。
目前，apoAI、apoB、Lp(a)、IgG、IgA、IgM、C3、C4、CRP等是该指标体系测定的临床项目。
五
其他颜色反应
蛋白质中的肽键能与碱性溶液中的铜离子反应生成紫红色的络合物，在一定浓度范围内，颜色反应强度与蛋白质浓度成正比。用于TP的测定。
溴甲酚绿(BCG)在非离子型洗涤剂Brij-35的存在下，能与白蛋白形成绿色络合物。用于Alb的测定。
重氮苯磺酸盐与胆红素反应生成红紫色偶氮胆红素。用于总胆红素和直接胆红素的测定。
甲基百里酚蓝(MTB)在碱性条件下能与钙、镁形成有色络合物。用于钙和镁的测定。
四.绩效评估方法
一个
主要绩效指标:
1.稳定性:指在规定条件下保存一段时间后，仍能达到相应的性能指标，如试剂空白色吸光度、线性范围、灵敏度等。
2.反应灵敏度:指分析物与单位浓度(或活性)反应产生的反应程度。反应程度越高，灵敏度越大。
3.精确度:结果之间的一致性程度
4.准确性:与参考测定程序的结果一致
5.线性范围:在规定的重复性和线性偏差下，测得的浓度或活性值与设定的浓度或活性值成比例关系的范围。
6.基质效应:基质是指样品中除分析物以外的成分。基质通常对分析物的分析过程有显著的干扰，并影响分析结果的准确性。例如，溶液的离子强度对分析物的活度系数有影响，这些影响和干扰被称为基质效应。
7.抗干扰:
8.其他:试剂/样品比、反应时间、价格等。
2
绩效评估方法
1.稳定性:持续观察，每日测试；热加速试验。
2.反应灵敏度:直接计算每单位浓度反应物的吸光度变化或变化率。
3.精度:根据NCCLS EP5-A。
准确性:根据NCCLS EP9-A2。
5.线性范围:根据NCCLS EP6-A。
6.基质效应:由回收率试验决定
7.抗干扰:根据NCCLS EP7-A。
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