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目前，分析液相色谱柱多为硅胶基质柱，细分为:

高纯硅胶柱:以高纯二氧化硅为填料，用途广泛，但只能在PH2.0-7.5，小于60度的条件下使用。由于强极性硅羟基(Si-OH)的强二次保留效应，其应用受到限制，已被键合相柱取代。

反相硅胶柱是以硅烷化硅胶为基质，表面键合弱极性官能团的固定相。目前广泛使用的有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(苯基)。它用于分离大多数有机化合物，应用范围最广。

正相硅胶柱:是以硅烷化硅胶为基质，表面键合极性官能团的固定相。目前较多的是NH2—(氨基)、CN—(氰基)、DIOL(二羟基，也常称为HILIC，用来分离有机酸和蛋白质等。).它们主要用于分离旋光异构体和极性相对较大的物质，这些物质不能用反相柱分离。

离子交换柱:是以硅烷化硅胶为基质，通过磺化作用键合强阳离子/阴离子基团(磺酸盐/季铵碱)的固定相，分为强酸性、强碱性、弱酸性、弱碱性等不同规格。用于分离溶解性强的有机盐化合物。(注意:不要和离子色谱混淆。离子色谱主要分离无机盐化合物或一些点状离子。)

2聚合物基质柱

聚合物基质柱是指以聚苯乙烯-二乙烯苯、聚甲基丙烯酸酯、多孔微球蛋白等聚合物凝胶为主要填料的色谱柱。与硅胶柱相比，它具有更强的疏水性和更宽的酸碱度范围(1.0 ~ 14.0)，但其柱效较低，因此主要用于凝胶渗透色谱(GPC)、凝胶过滤色谱(GFC)和分子排阻色谱(MEC)。主要用于分离蛋白质等大分子化合物。

3其他无机填料塔

这种色谱柱仅限于特殊应用，主要包括石墨化碳、氧化铝(Al2O3)、氧化锆(ZrO2)等填料。不需要表面修饰，自身表面可以强烈保留各种化合物。它可以在任何酸碱度(氧化铝除外，不超过12.0)和高温(高达100℃)下使用。其中，石墨化碳填充柱可以分离多种化合物，主要用于分离几何异构体；氧化铝柱刚性强，床层稳定，可分离多种化合物，多用于制备色谱；氧化锆柱比氧化铝柱具有更强的酸碱度范围和更高的耐受温度，但其应用有待进一步研究。

4创建一个列文件

色谱柱档案作为色谱仪器档案应受到重视，主要内容包括:品牌、型号、序列号、购买日期、购买发票、使用记录(使用日期、使用人、使用目的、使用状况)、维护记录(老化时间、老化人、故障现象、故障原因、处理方法、处理结果、图纸)等。，应该以文件框的形式保存，最好专门用于特殊的列。

(4)液相色谱柱的应用范围和特点

1个反相色谱柱

2个正相色谱柱

3聚合物基质柱

分离式聚苯乙烯填料塔主要用于分离蛋白质等大分子化合物，主要用于凝胶渗透色谱、GFC、MEC等。如果与离子交换基团键合，就形成了分离酸性化合物(磺酸基)、碱性化合物(季铵基)和药物代谢物的离子交换柱。特点:在1 < pH < 13的流动相中稳定；分离峰形状更好，柱寿命更长。

4其他无机填料塔

如氧化铝、石墨化碳、氧化锆、硅藻土等。，主要用于制备色谱。

(5)液相色谱柱的分离机理

(六)液相色谱柱制备过程简述

不同品牌的色谱柱制备工艺不同，但可以总结如下(以硅胶柱为例):

硅烷化硅胶的制备(四乙氧基硅烷脱乙基和聚合)→Si-OH基团的暴露(脱乙基和用H置换)→海绵状多孔硅胶的构建(物理均化过程)→官能团键合(各种官能团与Si-OH的键合)→端基封闭(残留Si-OH与小分子氯-甲基和氯-乙基的键合)→润湿混合(加入乙醇等)。所有厂家对其配方都有专利保护)→灌装(机械灌装或人工灌装，逐层灌装，压实润湿)→高压平衡(轴向压制或径向压制，所有厂家都有专利保护)→干燥(此步骤是关键工艺步骤，所有厂家都有专利保护)→压扁→组件安装→预平衡→柱效测试流动相平衡→柱效测试→密封→包装