谷氨酸酶(ALT)主要使用各种细胞,特别是肝细胞,肝脏内色氨酸酶含量约为血液中的100倍。正常情况下,只要向血液中释放少量,血清中酶的活性就会明显提高。各种病毒性肝炎的急性期、药物中毒性肝细胞坏死时,ATT大量释放到血液中,因此是诊断病毒性肝炎、中毒性肝炎的重要指标。肝细胞内谷胱甘肽酶的浓度比血清高1000 ~ 3000倍。色氨酸(特别是ATT)是急性肝细胞损伤的敏感标志,因为只有1%的肝细胞坏死可以使血液中的酶活性提高一倍。在肝细胞中,GPT将丙氨酸的氨基转移到a-酮戊二酸,酮戊二酸的羰基转移到丙氨酸,丙氨酸成为丙酮酸,A-酮戊二酸成为谷氨酸。

生理学

丙氨酸转氨酶(ALT)将丙氨酸的氨基转移到-酮谷氨酸上,促进丙酮酸和谷氨酸的形成。

ALT主要位于细胞质(线粒体含量少),和AST一样,要获得最大的酶活性,需要辅助因子P5P。

这是有用的具体指标肝细胞受损的狗和猫。阿尔特在大型动物和猪的肝脏疾病中不是有用的指标。因为这些物种的肝组织中酶活性低。SDH和GLDH是所有物种中ALT的可行象征。

狗血清半衰期为59小时,猫血清半衰期为24小时(约3 ~ 4小时)。急性肝损伤后,血清酶活性在约48小时内达到高峰,然后开始下降。酶的增加是由于细胞损伤(细胞膜通透性增加或坏死)和诱导(合成增加)。

长期特异性

ALT存在于肝脏、肌肉(心脏和骨骼)、肾脏、红细胞(某些种类)中。ATT在狗、猫、兔子、老鼠和灵长类动物的肝脏中具有相当的特异性。在狗和猫的严重肌肉疾病中,由于该组织的酶释放,部分增加是可能的。(在这种情况下,AST的高增加是典型的。)

检测方法

ALT催化ALA-KETOGLUTARATT和丙氨酸形成L-GLUTAMATATE和丙酮酸。阿尔特催化这种反应达到平衡,丙酮酸水平的提高随后可以通过乳酸脱氢酶(LDH)的存在量化NADH的原始量。用光度法测定NADH水平的降低,与丙酮酸的生成率成正比,丙酮酸的生成率与AT活性有关。

反应如下:

丙氨酸-酮谷氨酸ALT丙酮酸L-谷氨酸

丙酮酸nadh LDH l-乳酸盐NAD

度量单位

酶活性被定义为U/L (U=国际单位)和kat/L(国际标准单位),这意味着催化酶量的转换在指定条件下被定义为每分钟1 mol衬底。转换公式为:

0.0167u/l x=kat/l

样本注意事项:血清和血浆

抗凝剂:肝素钠、乙二胺四乙酸

稳定

人血清和血浆样品中ALT活性的稳定性(根据产品信息表)为:15-253天、2-87天、(-60)-(-80)7天以上。

一些因素的影响:

血脂/浊度、黄疸:无明显干扰。

溶血:在某些物种(如猫和猪)中,血管内或体外溶血可因红细胞释放ALT而增加活性。猪中100个单位的溶血使ALT中值增加了8 U/L (di Martino等,2015年)。

药物:抗惊厥药(普米农、苯巴比妥、培他英)可使ALT活性增加4倍。这些药物被认为能诱导ALT合成,但ALT活性的增加主要是由于肝细胞坏死。糖皮质激素增加谷氨酰胺约2 ~ 3倍。类固醇性肝病(发生肝细胞损伤的地方)的活动更高。这是由于目前渗透率的变化,而不是合成增加。所有能引起肝脏毒性的药物都可以增加ATT活性,如猫体内的四环素、狗体内的caparsolate和乙酰氨基酚。一些药物会削弱维生素B6的P5P活性,从而减少ALT(和AST)活动,如头孢菌素、环孢素和异烟肼。

ALT活动增加

人为因素:血管内或体外溶血可以提高猫或猪的溶血水平。猫红细胞对血浆的ALT比率很高。相比之下,溶血(血管内或体外)对牛、马、狗的ALT影响不大。

病理生理的:

肝病:在原发性和继发性肝病中都可以看到ALT活性的增加,如果发生细胞膜通透性变化或坏死,则不是肝病的特异性原因。ALT是坏死性或炎症性疾病中最高的,有些疾病,如肝细胞癌或肝功能衰竭,如果不发生活性肝细胞损伤,可能与ALT升高无关。在肝病中,ALT活性通常超过AST活性。残留的胆盐对肝细胞的毒性作用导致胆管堵塞或其他胆汁。

淤积的原因可能会增加ALT(和AST)活性。

胆汁淤积症时,胆汁淤积酶(ALP、GGT)和胆红素的升高幅度通常高于肝漏酶的升高幅度,这有助于明确胆汁淤积的主要病理过程,进而导致肝损伤。当肝损伤引起胆汁淤积时,漏酶增加倍数大于诱导酶,总胆红素可能正常或轻度升高。外伤常常会增加ALT活性,即使没有细胞损伤的形态学证据。

肌肉疾病:在大型动物中,ALT活性会随着肌肉损伤而增加,在这方面它并不比AST更有用,因此它没有被包括在大型动物化学小组中。严重肌肉损伤的小动物(猫缺血性肌病,犬肌营养不良,CK活性通常为> 10000 U/L), ALT随CK和AST活性增加。然而,在原发性肌肉疾病中,ALT活性的增加通常小于AST活性的增加,SDH值应该是正常的(除非并发肝损伤)(Valentine et al 1990)。

甲状腺功能亢进症:患有甲状腺功能亢进症的猫,其ALT、AST和ALP活动通常会轻微增加。

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