本文详细阐述了希尔的反应观察实验的原理、实验所需的材料、试剂、仪器以及实验的程序。
一、原理
希尔反应(Hill reaction)是绿色植物的离体叶绿体在光下分解水,放出氧气,同时还原电子受体的反应。氧化剂2.6-二氯酚靛酚是一种蓝色染料,接受电子和H+后被还原成无色,可以直接观察颜色的变化,也可用分光光度计,还可以对还原量进行精确测定。
二、材料、实验试剂与仪器
(一)材料
菠菜或其他绿色植物新鲜叶片。
(二)仪器设备
研钵,石英砂,小试管,试管架,漏斗,纱布,小烧杯,剪刀。
(三)试剂
0.1% 2,6-二氯酚靛酚。
三、实验步骤
取新鮮的菠荥或其他植物叶片0.5g,剪碎后放人研钵中,加少量石英砂,研磨成勾浆。加50mL蒸馏水,通过5~6层纱布,过滤到小烧杯中,即得到叶绿体粗悬浮液。
取试管两支。每管中加人叶绿体悬浮液5 mL,0.1%2,6-二氯酚靛酚溶液5~6滴,摇匀。将其中一管置于直射光下,另一管置于暗处,注意日光下的试管液颜色变化。5~8min后,将置于暗处的试管取出,比较两管溶液额色变化,并解释原因。
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