prp PRP-运动损伤和骨关节炎的最佳疗法

富血小板血浆(PRP)是通过梯度离心和分离自体全血获得的富含血小板的血小板浓缩物。血小板活化时，可释放多种生长因子，对成骨细胞和成骨细胞的增殖、生长、分化和组织形成起重要作用。自1998年Marx等人首次使用PRP复合骨移植修复下颌骨缺损以来，PRP已逐渐应用于口腔、整形外科、骨科、耳鼻喉科、神经外科等领域的组织修复。本文综述了PRP的分离制备、在骨科的应用及存在的问题，并对其应用前景进行了展望。

1.PRP的分离和制备

PRP浓缩物是根据血液中各组分的沉降系数不同，通过密度梯度离心从全血中分离出来的PLT浓缩物，但目前没有统一的制备方法。在PRP通过不同的离心次数、离心力、离心时间和不同的活化方式制备的血小板，血小板的数量、各种生长因子的浓度和白细胞的数量都是不同的，而且PRP的各种手术方法和应用时间也产生不同的生物效应，所以PRP的生物效应也存在差异。根据不同的生理和病理需要，制备不同生长因子含量的PRP是未来的研究方向。

PRP的制备方法可分为手工制备和自动制备。人工制备过程繁琐，但所需设备简单易行。自动配制需要专用设备，目前常用的是Sepax系统。离心后，手动分离法和自动血小板分离器的血小板数量无明显差异。尽管自动血小板分离器易于操作且自动化程度高，但制备的PRP血小板的纯度和浓度都很高。

但这种方法一般用于耗血(一般150ml以上)或建立静脉循环通道。目前主要用于成分输血的血库血小板采集。由于其成本高，限制了其广泛的临床应用。但无论什么制备方法，其制备原理都是相似的，即根据血液中各组分的沉降系数，分层制备。一次离心后，血液可分为三层，底层为沉降系数最大的红细胞，顶层为上清液，交界处有一薄层，即富血小板层。离心一次后，弃去上清液或红细胞层，然后改变离心力，再次离心，可以分离出更多的血小板。目前两次离心仍是制备PRP的常用方法。刘彩霞等比较了不同离心力和离心时间制备的PRP对动物模型牵张成骨的影响。结果表明，两次离心法(每次200 × g，10 min)制备的PRP血小板计数明显高于全血，是全血的6.17倍。血小板回收率在86%以上

促进新骨形成效果明显。离心力>:250 × g会导致血小板过度破坏，第一次离心时间为

2.富血小板血浆的作用机制PRP的功能是通过生长因子的相互作用和相互调节来实现的，生长因子在分泌后立即粘附在靶细胞膜表面并激活细胞膜受体。这些膜受体诱导内在信号蛋白并刺激细胞的正常基因序列表达。因此，PRP释放的生长因子不会进入靶细胞，不会改变靶细胞的遗传特性，只会加速正常的愈合过程。虽然所有细胞因子参与组织修复和重建的机制尚不清楚，但细胞因子对组织修复和重建的部分作用已经明确。比如PDGF是最早出现在骨折部位的生长因子之一，可以刺激骨髓基质细胞的有丝分裂，增加成骨细胞的数量；刺激内皮细胞的生长，

促进植入区毛细血管的形成；还能刺激单核巨噬细胞的趋化性。作为有丝分裂和生物趋化因子，可在创伤骨组织中高表达，促进成骨细胞的趋化和增殖，增加胶原合成能力；TGF-β以旁分泌和/或自分泌的方式作用于成纤维细胞、骨髓干细胞、成骨细胞和破骨细胞，刺激成骨细胞和成骨细胞的趋化性、有丝分裂和胶原纤维合成，抑制破骨细胞的形成和骨吸收，在骨折修复中起着极其重要的作用。IGF促进成骨细胞的增殖和迁移，提高成骨细胞的活力。VEGF可以诱导内皮细胞增殖和迁移，从而促进新生血管形成。此外，活化的PLT同时释放大量蛋白质，对组织再生具有重要意义。凝血酶可以从周围组织中募集血管内皮细胞，增强其活力。凝血酶在人脐静脉三维培养条件下，可以刺激成纤维细胞的增殖和新毛细血管的形成，同时可以诱导负反馈，从而限制新毛细血管的合成。纤维蛋白刺激角质形成细胞的迁移，实现细胞间的相互作用，对细胞形态的恢复具有重要意义。

3.期待用生物学方法解决生物学和医学问题是目前组织修复研究的热点。PRP完全自体，无疾病感染和免疫排斥，从根本上解决了疾病传播的危险和骨组织工程一直面临的移植物难以存活的问题；PRP含有多种高浓度的生长因子，每种生长因子的比例与体内正常比例相似，具有最佳的协同效应，既有单个因子的生物效应，又有各种生长因子之间的相互作用。这在一定程度上弥补了单一生长因子刺激成骨不良的缺点，满足了早期骨愈合所需生长因子的需求；PRP能促进凝血，刺激软组织再生，促进早期伤口愈合；PRP所含生长因子不进入细胞或细胞核，加速正常愈合过程，无致畸作用，无诱导肿瘤形成的能力；PRP制作简单，对病人伤害小。只能从病人的静脉里取血才能做出来。国外有专门制作PRP的仪器，操作简单，所需时间短。因此，PRP安全、简便、廉价，可用于骨科的各种治疗领域，具有广阔的应用前景。