抗凝管是用抗凝剂处理防止血液凝固的试管,用于医疗和生物实验。医院抽血用的抗凝管,不同用途颜色不同,含有不同的抗凝剂,但是你知道抗凝的原理吗?
1.肝素
2.乙二胺四乙酸
3.柠檬酸钠
4.草酸钠
1.肝素
肝素广泛分布于肺、肝、脾等几乎所有组织以及血管周围的肥大细胞和嗜碱性粒细胞颗粒中。它是一种含有硫酸基团的粘多糖,是一种平均分子量为15,000 (2000-40,000)的分散物质。肝素可以增强抗凝血酶ⅲ(AT-III)对丝氨酸蛋白酶的灭活作用,具有防止凝血酶形成、抗凝血酶、防止血小板聚集等多种功能。每毫升血液需要15±2.5 iu抗凝。肝素虽然能保持红细胞的自然形态,但往往会引起白细胞聚集,在染色时产生蓝色背景,所以用肝素抗凝的血样不适合全血的一般检查。肝素是红细胞渗透脆性试验的理想抗凝剂。
肝素是测定血液化学成分的最佳抗凝剂。其抗凝机制是在低浓度下抑制因子ⅸ a、ⅷ与PF3的相互作用,增强抗凝血酶ⅲ使丝氨酸蛋白酶失活,从而阻止凝血酶的形成。它还抑制凝血酶的自催化作用和抑制因子X的作用..
肝素的盐包括钠盐、锂盐和铵盐。通常肝素抗凝剂量为10.0~12.5IU/mL血液。肝素锂是临床常用的。虽然贵,但抗凝血效果更好。血清和肝素抗凝血浆的某些生化成分明显不同。在血液凝固过程中,由于红细胞的溶解和破坏,血清中钾的含量高于血浆,血浆中Fg的含量高于血清。因此,在测定钾离子时,应注意血清和血浆的差异。
此外,肝素过量会引起白细胞聚集和血小板减少,因此不适合白细胞分类和血小板计数,不能用于止血试验。实验表明,采血时加入肝素钠抗凝剂对血液中总蛋白含量的测定有明显影响。加入抗凝剂后,凝血活酶的生成被阻断,血液凝固被阻止,使纤维蛋白原不能水解转化为纤维蛋白单体,有效阻止了纤维蛋白单体的形成,这些纤维蛋白原保留在血浆中。血清是凝血后的血液,纤维蛋白原水解成纤维蛋白单体,被凝血消耗掉,然后离心后与血细胞分离。
2.乙二胺四乙酸
乙二胺四乙酸(EDTA)有二钠盐、二钾盐、三钾盐。两者都可以与钙离子结合形成螯合物,从而防止血液凝固。EDTA盐对红、白细胞形态影响不大,因此采用EDTA二钾作为血细胞计数的抗凝剂。EDTA-2Na和EDTA-2K对血细胞计数影响不大,但二钠的溶解度明显低于二钾,有时会影响抗凝效果。其他抗凝剂不适合血细胞计数。
乙二胺四乙酸是临床检查中最常用和最重要的抗凝剂和试剂之一。其机理是通过与水中的钙离子形成稳定的螯合物来防止血液凝固。乙二胺四乙酸的盐包括钾、钠和锂,它们都溶于水。钾盐比钠盐更易溶解,所以全血细胞计数最好用EDTA的钾盐。
乙二胺四乙酸能影响某些酶的活性,抑制狼疮因子,因此不适合做组织化学染色和检查红斑狼疮细胞的血涂片。乙二胺四乙酸也影响血小板聚集和白细胞吞噬,不适合止血和血小板功能试验。
EDTA抗凝制备的涂片对粒细胞形态有影响,影响程度与抗凝时间和抗凝浓度有关。根据ICSH的建议,乙二胺四乙酸的使用浓度应为1.4~1.6g/L血液,并应迅速准备涂片。粒细胞的形态特征略有改变,有时核小叶缺失,细胞肿胀。如果用长期放置的血液制备涂片,细胞质中的颗粒消失,细胞质和细胞核中有空气泡,染色质模糊。在血液浓度大于1.5g/L制备的血涂片中,粒细胞可以完全变性,这也影响淋巴细胞和单核细胞,特别是血小板,它们可以肿胀和破裂产生碎片,影响它们的计数,导致高结果。
3.柠檬酸钠:
柠檬酸盐能与血液中的钙离子形成可溶性螯合物,从而防止血液凝固。柠檬酸钠的晶体很多,比如Na3C6H5O7 2H2O,Na3C6H5O7 5.5H2O..前者通常用于制备109毫摩尔/升(32克/升)的水溶液(106毫摩尔/升的浓度也是有用的),其以1∶9或1∶4的比例与血液一起使用。柠檬酸钠对凝血因子V有很好的保护作用,降低其活性,因此常用于凝血图像的检查和红细胞沉降率的测定。
枸橼酸盐主要用于止血试验和血沉测定。由于毒性低,也用于输血维持液。其抗凝机制是柠檬酸盐与血液中的钙离子形成可溶性螯合物,从而阻止血液凝固。
柠檬酸钠和血液以1:9的比例使用。对于用于监测口服抗凝剂(如华法林)治疗的患者,用于测定PT和APTT的柠檬酸钠浓度不应随意改变,因为它可能会影响国际标准化比率(INR)。
4.草酸钠:
草酸盐通过其在血液中的草酸盐和Ca2+离子形成草酸钙沉淀,因此没有凝血功能。
草酸钾常用于血液样本的抗凝检查。向试管中加入2滴饱和草酸钾溶液(或0.2毫升10%溶液),轻轻敲击试管,使溶液分散在管壁周围,在80℃以下的烘箱中烘烤(烘烤温度过高,草酸钾会分解成碳酸钾而失效)。每管可使3~5ml血液不凝固。用于钾和钙测定的血样不能用草酸钾抗凝。
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