duffy Duffy血型系统简介

发现历史和命名:

达菲血型是较早发现的血型系统。1950年，Cusbush等人在一名多次输血引起溶血反应的患者血清中发现Fya抗体。因为患者姓杜菲，所以新发现的血型被命名为杜菲血型。一年后，Ikin等人发现了与Fya抗体相对应的Fyb抗体。1995年，国际输血协会将达菲血型系统编号为008。Fya抗原和Fyb抗原在出生时已完全发育，可在妊娠早期6-7周检测到。达菲血型因其在临床应用中的重要意义而备受关注。最新研究表明，达菲血型不仅与输血安全和母婴血型不合引起的新生儿溶血病有关，达菲抗原还可以作为趋化因子在人疟原虫受体、炎症、肿瘤、移植排斥等方面发挥作用。

1.达菲血型系统抗原表达和基因结构特征

达菲血型系统包含六种抗原:Fya、Fyb、Fy3、Fy4、Fy5和Fy6。因为Fy4发现了相应的抗体，所以Fy4没有确诊，只是放入了Duffy抗原讨论。Duffy抗原不仅可以在红细胞上表达，还可以在脑、大肠、内皮细胞、肺、脾、甲状腺、胸腺和肾脏的细胞膜上表达，而不能在粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、肝脏和胎盘的细胞膜上表达。

达菲血型是位于细胞膜表面的糖蛋白，分子量为35000~50000，是一种趋化因子受体。Fya和Fyb对大多数蛋白水解酶敏感。经木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶、菠萝蛋白酶、链霉蛋白酶和胰蛋白酶处理的红细胞可完全破坏Fya和Fyb抗原。用血清学方法，Duffy血型可分为四种常见的表型:Fy、Fy、Fy和Fy。

达菲血型蛋白质结构示意图

达菲血型的基因从1q22到23，基因名为DARC，基因产物为fy糖蛋白。Fy抗原基因有两个外显子和一个内含子。基因号2532，基因库注册号NM-002036，基因克隆于1993年。FyA和FyB受Fya、Fyb和Fy调节。FyA和FyB在125位碱基不同，FyA为g，FyB为a，导致转录的mRNA在42位氨基酸编码不同。FyA和FyB基因共显性，Fy基因沉默是突变引起的，基因表型纯合，表达为Fy，膜上无Fy糖蛋白。Fy沉默基因和FyB基因基本相同，在T33C突变。突变点位于GATA序列中，即从CTTATCT到CTTACTT。该编码区上游的GATA-1的转录与突变结合产生纯合子，从而阻止Fy糖蛋白肽链的合成。这种突变仅在红系中表达，表明红细胞中没有DARC，表达为Fy表型。奇怪的是，非红细胞系统不受影响，除红细胞外，所有组织和细胞上的DARC和Fy抗原都能正常表达。

达菲血型基因在1号染色体上的位置

二、达菲血型系统的种群分布特征

显型

基因型

概率/%

欧洲人

非洲人

日本的

Fy

Fya/FybFya/Fy

20

10

81

Fy

Fya/Fyb

48

三

15

Fy

fyb/fybybb/Fy

32

20

四

Fy

Fy/Fy

0

67

0

欧洲和非洲人种Fy血型的表达频率明显高于亚洲日本人，而Fy的表型是沉默基因Fy的纯合产物。非洲黑人和美国黑人在FYA和FYB频率上有差异，但FY基因沉默频率高于欧洲人，非洲黑人Fy表型在90%以上。中文Fya的表达频率为99%，而Fyb为9.2%。

疟原虫感染的全球流行趋势

三、达菲血型系统的抗体特征

抗FY抗体大多是免疫产生的，“天然抗体”很少。人血清中的抗Fy抗体多为IgG1。大多是妊娠刺激因子产生的抗Fya，产生抗Fy3还有其他原因。

1.抗Fya是常见的，其中大多数是免疫抗体，可引起HDN和急性及慢性输血反应。IAT大部分抗Fya抗体阳性，约50%可激活补体C3，通常引起慢性溶血反应，但临床症状较轻，部分可引起严重急性溶血反应。

2.抗Fyb很少见，产生抗Fyb的概率只有抗Fya的1/20，是一种罕见的抗体。抗Fyb，通常是IgG1，可以通过HDN和输血产生。大多数抗Fyb IAT抗体呈明显阳性，部分抗Fyb抗体在生理盐水中可发生反应。抗Fyb的溶血反应一般比较严重，抗Fyb结合补体。

3.抗Fy3罕见，常出现在Fy表型血浆中，但不与Fy红细胞反应，但与Fy、Fy和Fy红细胞反应。抗Fy3可因HDN和输血而产生，抗Fy3的性质具有抗Fy1和抗Fy2的共性。红细胞的Fya抗原和Fyb抗原经蛋白酶处理破坏后，不再与抗Fya和Fyb反应，但仍与抗Fy3反应。抗Fy3引起的HDN和输血反应一般都很严重。

4.抗Fy5也是一种罕见的抗体，类似于抗Fy3。抗Fy5不与RHnull细胞、RHnullFy3阳性红细胞和黑色Fy红细胞反应。而抗Fy3不与RH反应，但与RHnullFy3反应，不与Fy反应。

5.抗Fy6是一种小鼠单克隆抗体。它与Fya抗原和Fyb抗原反应，但不与Fy红细胞反应。抗Fy6识别Fya抗原和Fyb抗原共有的高频抗原位点片段。

四、杜飞血型系统检测方法

检测达菲血型的方法有很多，如血清学表型检测、基因检测、功能检测等。Fya和Fyb对大部分蛋白水解酶敏感，因此Duffy血型抗原不能用酶法检测，可以用间接抗球蛋白和其他具有相应血清抗体的促凝介质实验进行鉴定。此外，用Fya、Fyb、Fy6和Fy3单克隆抗体通过流式细胞术分析其Duffy血型抗原，并估计红细胞上Duffy抗原位点的数量。达菲抗原数量的变化也可以通过用从红细胞膜分离的糖蛋白进行免疫印迹来检测。基于对达菲血型基因结构中FYA、FYB和FY等位基因碱基变化的认识，设计了一种基于聚合酶链反应的分子生物学技术来判断其基因型。常用的基因检测方法是PCR-SSP，可以用4个特异性引物对Duffy基因进行分型。达菲基因型的聚合酶链反应-过磷酸钙法虽然简单，但FYA等位基因和FYB等位基因的特异性引物只相差一个碱基，因此特异性扩增产物容易出现假阳性。聚合酶链反应-RFLP检测达菲血型基因也存在这些问题，很难同时检测fyA、FYB和FY基因型。解决上述问题的最佳途径是建立达菲血型基因的DNA基因测序技术，通过对达菲基因编码区和基因启动子区的序列进行测序，准确了解达菲血型基因的结构。

5.达菲血型的生物学功能及临床意义

1.间日疟原虫裂殖子是间日疟原虫的受体，其表面有达菲结合蛋白，该蛋白与DARC蛋白结合，然后侵入红细胞。然而，由于缺乏DARC，Fy表型红细胞没有被疟原虫感染。

疟原虫生命周期

2.Fy抗原与自身免疫性疾病在一些自身免疫性疾病如类风湿性关节炎中，Fy抗原的表达增加。

3.Fy抗原和哮喘Fy抗原及趋化受体CCR5和CXCR1参与肺移植免疫排斥反应，介导肺细胞损伤。

4.DARC是一种异源趋化因子受体，可能是HIV-1受体。作为受体清除剂，DARC具有结合白介素-8和促进肿瘤血管生成的能力。DARC的正常表达在炎症反应中调节白细胞迁移中起重要作用。DARC也与移植排斥有关。

5.Fya和Fyb对输血和HDNFya、Fyb抗原有中度免疫，其抗体可由多胎妊娠引起，但多为输血产生，其抗体可引起急慢性输血溶血反应。

参考文献:

1.张志钦，张力文，谢一平，等.达菲血型系统抗原的研究进展.临床血液学杂志，2017，30:327-330。

2.苏玉清，梁艳莲，张银泽，等.杜飞血型研究及临床应用新进展.检验医学，2012，30 : 452-455。

3.AABB技术手册

-

QQ 1969302766