通过载体把目的基因片段导入活细胞。构建基因表达载体也就是把目的基因和载体连接，使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。
基因表达载体的构建是基因工程最重要的一个步骤。将目的基因与载体通过DNA连接酶连接形成一个整体，方便后续载体携带目的基因进入受体细胞，并将目的基因成功与受体细胞转导。
目的基因就是能够产生所需蛋白质的DNA片段，比如抗虫棉就是植入能产生抗虫蛋白的目的基因。
启动子、终止子：启动子、终止子是目的基因DNA上特殊排序的碱基。RNA从启动子开始转录、翻译，到终止子结束。整个过程完成后便产生所需蛋白质。
标记基因：用于检测是否已经植入目的基因。植入的成功率其实很低，所以有必要选出已经植入的个体。比如抗虫棉，判断是否植入，用种植后让虫子吃的方法判断周期太长。所以在目的基因前或后植入比如抗四环素基因（如果目的基因成功植入，抗四环素基因也一起植入），然后用四环素来淘汰植入失败的个体，剩下的都是还有目的基因的个体。除了抗四环素基因，还有荧光基因等，总之就是方便检测。
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