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PDsRed2-N1产品信息

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pDsRed2-N1编码DsRed2，一种DsRed变体，被设计用于更快的成熟和更低的非特异性聚集。来源于盘状体。红色荧光蛋白(drFP5831)，DsRed2，像它的祖先DsRed1一样，包含一系列沉默的碱基对变化，这些变化对应于人类在哺乳动物细胞中高表达的密码子使用偏好(2)。除了这些变化，DsRed2还含有6个氨基酸取代:V105A、I161T和S197A，这导致在转染的细胞系中更快地出现红色荧光；R2A、K5E和K9T，它们阻止蛋白质聚集。(然而，DsRed2可能与DsRed1 [3]形成相同的四聚体结构。)在哺乳动物细胞培养物中，当DsRed2组成型表达时，可以在转染后24小时内通过荧光显微镜检测到发红光的细胞。在表达DsRed1的细菌和哺乳动物细胞系统中经常观察到的大的不溶性蛋白质聚集体在表达DsRed2的细胞中显著减少。成熟更快、更易溶解的红色荧光蛋白也能被宿主细胞很好地耐受；用DsRed2转染的哺乳动物细胞培养物没有显示出明显的生存力降低的迹象——在那些测试的细胞系中，表达DsRed2的细胞显示出与未转染对照组相同的形态(例如，粘附、光折射)和生长特征。

pDsRed2-N1中的多克隆位点位于巨细胞病毒早期启动子和DsRed2编码序列之间。克隆到MCS中的基因以融合体的形式表达到DsRed2的氮末端。DsRed2上游的序列已被转化为科萨克共识翻译起始位点，以提高真核细胞的翻译效率(4)。DsRed2基因下游的SV40多聚腺苷酸化信号指导DsRed2基因3’端的正确处理。载体主链包含用于在表达SV40 T抗原的哺乳动物细胞中复制的SV40原点，用于在大肠杆菌中繁殖的pUC原点，以及用于单链DNA生产的f1原点。新霉素抗性盒(Neor)允许使用G418选择稳定转染的真核细胞。该盒由SV40早期启动子、Tn5的新霉素/卡那霉素抗性基因和来自单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV TK)基因的多腺苷酸化信号组成。盒子上游的细菌启动子赋予了对大肠杆菌的卡那霉素抗性。

产品手册

有关产品规格，请联系奥诺吉恩技术支持。

向量序列

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