前言
口服给药是动物实验中最常用的给药方法之一,尤其是在动物建模、毒理学、疗效、剂量确定等生理学、药理学和免疫学研究中。该方法操作简单,剂量准确。可以溶液或混悬液给药,可以反复给药。适用于小鼠、大鼠、兔等实验动物。口服看似简单,其实很有学问。初学者常因操作技术不当而损伤小鼠的气道或食道,甚至损伤小鼠内脏,导致小鼠死亡,导致实验失败。在这里,我们来看看胃内给药和注射的技巧和经验。
灌胃给药:
用胃注射针将药物溶液或混悬液直接倒入动物的胃中。
小鼠灌胃给药示意图
药物循环途径:
食道→胃→小肠→小肠毛细血管→空回肠静脉→肠系膜上静脉→肝门静脉→肝→肝静脉→下腔静脉→右心房→右心室→血液循环。
特点:
操作简单:溶液或混悬液可灌服,只要药物均匀稳定,可反复给药
高安全性:口服是各种给药方式中最安全的;
服用量大:小鼠0.5-1毫升,大鼠3-8毫升。
生物利用度低:药物通过胃肠道吸收,胃肠道和肝脏有首过代谢,因此生物利用度相对较低;
实验动物伤害风险:容易对动物造成一定程度的机械和心理影响。
常用实验动物一次最大胃灌注量
胃内给药工具:
带倒置滴针和注射器的金属胃灌注针。根据针管和针头的大小,可以分为不同的类型,包括直头和弯头。
小鼠和大鼠的不同模型说明
一般根据小鼠年龄选择不同类型的胃内针。比如裸鼠或者5周龄以下的幼鼠可以用6号,体重小于30g的可以用8号或者9号,体重大于30g的可以用12号。
不同类型胃灌注针的长度、直径及适用范围
实验操作:
1.实验准备:灌胃前应禁食4 ~ 8小时,以免胃内容物过多妨碍灌胃注射,影响药物吸收率。
2.药物吸收:根据小鼠体重计算剂量,安装胃注射针和注射器,将吸收的药物放在一边备用。
3.捕捉和固定老鼠:抓住尾巴捕捉老鼠,尽量避免刺激动物,抓住尾巴的位置不要太靠近尾巴。将鼠标放在粗糙的表面,用左手拇指和食指抓住耳朵和头颈部皮肤,用左手手掌和小指无名指夹住尾巴,使头颈部与身体成一直线,腹部朝上。注意不要让它动,颈部皮肤也不要拉得太紧。如果抓取不当,记得放开再抓取,避免后续操作出现问题。
4.注药:右手持注射器,从嘴的一侧将针头插入口中,避开牙齿,通过舌面沿上颚慢慢将针头插入下食道,轻轻移动避免损伤食道,遇有阻力可轻微上下滑动。鼠标吞咽时,感觉阻力消失下降空,缓慢前进。一般当针插入小鼠体内3 ~ 4 cm时,即胃中充满3/4针时。如果动物挣扎强烈,呼吸困难,或对进针有较大阻力,应立即停止进针并拔出针,待动物恢复平静后再行尝试。注射后,释放小鼠,观察如无呼吸异常,可确认胃灌注成功。
大鼠和小鼠灌胃给药操作是实验动物给药的基本技能。新手一定要多练习,掌握正确的操作方法和技巧,才能进行实验。遇到各种情况找原因,总结探索,找到适合自己的技巧。
参考文献:
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常用小实验动物灌胃给药技术与方法介绍:童紫2008
为什么我的小鼠灌胃后经常死亡?邦耀实验室2018
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