呼吸道病毒 常见七项呼吸道病毒是这样检测的---

呼吸道病毒是指一大类能侵犯呼吸道，在呼吸道粘膜上皮细胞增殖，引起呼吸道局部病变或仅以呼吸道为侵入门户，主要引起呼吸道外组织器官病变的病毒。 常见的七项呼吸道病毒包括：A型流感病毒、B型流感病毒（乙型流感病毒）、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒1、2和3型。 下面看看我们是如何检测的。 病毒侵入呼吸道黏膜柱状上皮细胞，与细胞膜上的唾液酸受体结合，并在细胞内增值引起细胞变性、坏死、脱落、黏膜充血、水肿等。 因此，鼻咽部的柱状上皮细胞内含的病毒滴度相对较高，采集该部位的样本利于病毒的检出。
这是我们使用的鼻咽拭子（呢绒植绒拭子）。
临床医师利用鼻咽拭子（呢绒植绒拭子）采集标本，拭子伸入鼻部后向鼻咽部水平伸入，伸入距离为从耳垂部到鼻尖长度的一半，一般针对两周岁以下儿童，伸入距离约为拭子绒毛头的长度两倍。拭子伸入后要轻轻捻动拭子转圈，取样后用生理盐水没过拭子头及时送至检验科。 如果取样时没有采集到细胞，后期实验都是徒劳啊！ 这是临床科室送到我科的鼻咽拭子标本，收到标本后我们首先认真检查并核对标本信息。如果临床医师取样后没有加入生理盐水，我们会及时沟通，根据取样时间来决定由我们补充生理盐水或临床医师重新取样。 标本信息核对无误后，对标本编号并核收计费。 首先需要将鼻咽拭子取到的鼻咽部柱状上皮细胞洗脱下来，用剪刀剪下拭子头置于1.5ml离心管中，离心管中加入1ml PBS。 通过涡旋振荡将细胞洗脱下来。一般涡旋1-3分钟即可，此时管中液体稍有浑浊。 振荡结束后，用镊子弃掉拭子头，2500转离心5分钟，将细胞离心至管底。有些标本粘液过多，需要重悬细胞后加PBS再次漂洗，防止粘液中杂质影响后期荧光检测。 离心后，弃掉大量上清液，剩余150-300微升上清液，重悬细胞，移液器吸取20ul细胞悬浮液于载玻片中，每份标本滴7滴，风干玻片。 为了缩短检验时间，用吹风机可加快风干。 风干后滴加抗体，每份标本7个孔，对应滴加7种抗体。 恒温培养箱中孵育15-30min后，使用试剂盒中稀释后的40X洗液将玻片上的染色试剂清洗干净，再用吹风机风干玻片。 滴加2到3滴固定液，并加盖盖玻片（20X50 mm），要注意避免产生气泡。 在200倍放大荧光显微镜下观察结果，一个视野下观察到2个发果绿色荧光的细胞 则该标本为阳性。无绿色荧光则为阴性。 如果镜下没有看到细胞，我们会与临床医师沟通要求重新采样送检。 这就是常见七项呼吸道病毒的检测过程，检测时长大约2小时。 我科采用的直接免疫荧光法可对常见七项呼吸道病毒感染做出早期快速诊断，为临床医师提供优质、高效的诊断结果，以便及时给予患者针对性治疗，避免抗生素的不合理使用，进而减轻患者负担。