沙塘人工繁殖技术研究进展
_抒情等
沙塘鱼属(Odontobutis)鱼类属于鲈鱼型(PERCI FORMES)虾虎鱼亚目(Gobiidae)糖鱼科(ODONTOBUTI DAE),俗称土目前,中国至少有4种四糖鲶鱼,即河塘鲶鱼(Odontobutis potamophila)、中华四糖鲶鱼(Odontobutis sinensis)和鸭绿四糖鲶鱼(Odontobutis yalu)
近年来,萨唐属鱼类的自然生存环境受到人为干扰和破坏,加上过度捕捞和过度捕捞,不重视野生种质资源库的动态检查,其野生栖息地的逐步减少,野生资源的急剧减少,群体结构的破坏,种质特征和纯度的丧失,野生群体小型化、低龄化。鸭绿糖和海风糖果被列入2004年的《中国物种红色名录》,河川糖果被列入2010年的《世界自然保护联盟濒危物种红色名录》,本研究总结了近年来四糖松鱼人工繁育技术的研究成果,为四糖松鱼种质资源保护和可持续开发利用、人工繁育和养殖业提供了理论参考
1萨唐鲶鱼的繁殖习惯
糖果鱼类大多数在1冬天年龄成熟,繁殖季节为每年4 ~ 6月,繁殖高峰为4月中旬至5月下旬。繁殖期,雄性通常引诱雌性进入石缝、洞、瓦等隐蔽巢穴,分批异步产卵,受精卵黏着、一般附着在岩石缝石等隐蔽物上发育,雄性在雌性孵化后离开之前,会进行防止外敌入侵的鸡蛋保护行动。沈凤杰等人和赵德良研究表明,糖果中的蛋与体长、体重有密切关系,在一定范围内,蛋的量与体长、体重有正相关关系。(大卫亚设)。
2种沙塘鳢的人工繁殖技术
2.1父母的选择和培养
目前,亲本大多数是在天然水域捕获获得的,一般选择体质健壮、自大、无病无常的亲鱼,雌性在2冬以上,体重大于50克,雄性在1冬以上,体重大于75克,在亲池塘里培育到性成熟,选择性腺发育良好的亲鱼繁殖。成年雌性颜色浅灰黄色,体表粗糙,粘液少,腹部膨胀,柔软,卵巢轮廓清晰,生殖乳突桶宽、圆、扁平的圆形管子。雄性体色深,剑黄,体表光滑,粘液多,生殖乳突短而尖,三角形。
糖果繁殖季节在春季亲本催种之前,通常要进行强化栽培。一个是为了补充冬季鱼体的消耗,另一个是为了给性腺发育的需要提供足够的营养。杨黄发现,在河沙糖鱼雌性、雄性亲鱼发育过程中,蛋白质转移到性腺上积累。亲本培养地面积0.067~0.100 hm 2,水深1.5米左右为宜,满足水源充足、水质良好、排水方便等条件,在池塘内种植少量水草。螳螂虾是底栖肉食性鱼类,一般以麦穗鱼、杂虾、螺肉等为食,可搭配人工配制的虾和豆饼等,每天投喂量一般为鱼体重的3% ~ 5%,取决于亲本摄入和活动。此外,亲本组还可以杂交部分鲭鱼、鲭鱼,提高鱼饵利用率,调节水质。从3月中旬开始,亲本杂志每周下一次水,从3月下旬开始到生产前每周下2~3次水,促进亲鱼性腺发育。
2.2人工催产素
螳螂虾是鱼类小巢型产卵鱼类,卵是黏着卵,所以在人工繁殖时要人工制造卵巢。卵巢生产材料一般多用PVC管,60度左右用聚乙烯网做内衬,鱼卵可以通过网孔防止重叠,用拱形瓦和网纱做卵巢。卵巢在注射催产剂前投下,投下前用高锰酸钾溶液浸泡5~7 d。目前,糖果通过鱼类的人工催产,通过药物注射自然产卵或改变环境因素,诱导自然产卵的方式(如水刺激法)。催产剂多用于鲤鱼脑垂体(PG)、绒毛膜促性腺激素(HCG)、孕酮释放激素类似物2号(LRH-A 2)、马来酸噻酮(DOM)等鱼类,根据试剂、注射次数和注射位置,催产素
表1萨糖鱼催产剂剂量
2.3散射和受精卵收集
亲鱼注射催产剂后,放入产卵罐等待分娩,调节水温,24小时充气,排卵中用微量油水刺激亲鱼。一般亲鱼从半夜到早晨产卵,所以每天
下午查看产卵情况,当产卵巢表面 80% 面积覆盖卵粒时,将产卵巢用 10 mg/L亚甲基蓝溶液浸泡 3~4 min后转入孵化池。若未产卵的空巢附有较多污泥,需及时清洗以防影响亲鱼产卵及鱼卵黏附,污泥较少则不必处理,尽量减少对亲鱼的惊扰,防止亲鱼流产或半产。2.4 孵化
沙塘鳢属鱼类受精卵的孵化时间较长(表 2),因此受精卵孵化的日常管理尤为重要,孵化可在网箱、水泥池、玻璃钢以及塑料孵化桶内进行,且大多采用微流水充气孵化。朱元宏等通过研究不同孵化方式对孵化结果的影响,发现水泥池流水和玻璃缸微流水两种流水孵化方式的孵化率均在 70%以上,而水泥池静水孵化的孵化率为 53.4%。受精卵孵化时需严格用80目筛绢过滤,去除孵化用水中的敌害生物。此外,每隔3 d泼洒20 mg/L高锰酸钾进行消毒,以防受精卵感染水霉病,且产卵后第2天要检查并及时剔除未受精的白卵。
表2 沙塘鳢属鱼类受精卵的孵化时间
2.5 苗种培育
沙塘鳢属鱼类从受精卵孵化出膜至鱼苗下塘的培育阶段是提高苗种成活率的关键。但该阶段的鱼苗口径较小,且贴边靠底生活,苗种培育过程中要保证开口饵料的适口且充足,调节水质保证溶氧,并注意防治疾病。鱼苗早期的开口饵料以轮虫、小型枝角类和桡足幼体为主,可辅助投喂蛋黄、鱼浆、豆浆等。鲍华江 用6种不同开口饵料投喂2日龄的河川沙塘鳢仔鱼8 d后,发现用枝角类、丰年虫和水蚯蚓饲喂仔鱼均有良好的生长性能,且效果上呈现丰年虫>水蚯蚓>枝角类,用配合饲料、鱼糜、蛋黄饲喂时,仔鱼几乎不生长,这与李园园等 发现蛋黄和鱼苗配合饲料不适合作为沙塘鳢仔鱼开口饵料的结果一致。丰年虫饲养的仔鱼成活率最高,达96.67%,但是枝角类可能携带小瓜虫幼虫或虫卵而使仔鱼感染疾病,导致成活率仅38.89%,故在苗种培育中,需保证外源性活饵料不携带致病菌和寄生虫,并进行严格的消毒处理。
3 沙塘鳢属鱼类的育种现状
目前,有关沙塘鳢属鱼类育种的研究工作,主要集中在染色体核型分析 、群体遗传多样性分析 、种群遗传结构分析 等。如李妍等 利用ISSR 分子标记技术分析常熟河川沙塘鳢群体的遗传差异性,发现个体大的沙塘鳢的遗传多样性水平略高于个体小的沙塘鳢;王丹等 以线粒体Cyt b基因为分子标记,分析长江及珠江流域中华沙塘鳢的9个野生种群的遗传多样性,发现各种群间存在显著的遗传分化,且种群间的基因交流有限,并推测中华沙塘鳢基因交流的方向是由长江水系种群流向珠江水系种群。然而,有关沙塘鳢属鱼类优良品种培育的研究较少。张丽娟以河川沙塘鳢为母本、鸭绿沙塘鳢为父本进行种间杂交,采用人工干法授精获得正常发育的杂交子代,并利用EST-SSR分子标记技术来研究母本、父本和杂交子代 3个群体的分子遗传机制,结果表明,杂交子代接受父本的遗传信息更多,且杂交子代肌肉的氨基酸以及必需氨基酸总量介于双亲之间,说明这有望整合双亲的优缺点,培育出生长快、抗病强、个体大、营养价值高的新品系。王佩佩等 和丁严冬 对建德、当涂和太湖 3个县市地理群体的河川沙塘鳢进行3×3完全双列杂交获得杂交子代,分析发现双列杂交子代的杂合度和遗传多样性高于自繁子代,综合考虑全长增加率、质量增加率和遗传多样性等,得出建德(♂ )×当涂(♀ )为最佳杂交组合。另外,他们还采用巢式设计,对建德、当涂、射阳和太湖4个不同县市地理群体的河川沙塘鳢进行群体内和群体间杂交,构建了48个家系,最终获得了 34个家系,进而分析了不同家系子代的生长性状指标,为后期河川沙塘鳢的家系选育奠定了基础。总体来说,中国关于沙塘鳢属鱼类育种的研究较少,良种问题也一直没有解决,因此沙塘鳢育种工作仍是研究的重点和热点。
4 展望
沙塘鳢属鱼类人工繁育技术的研究有利于其种质资源的保护和可持续开发利用,随着人工繁殖技术的不断完善和突破,沙塘鳢属鱼类苗种的产量不断增加,其养殖规模也逐渐扩大。综合目前研究成果来看,若要实现沙塘鳢属鱼类规模化人工繁育,还应开展以下几方面的相关研究:①沙塘鳢属鱼类个体小,雌性个体绝对怀卵量不高,且不同研究者使用不同的催产药剂与浓度,注射位置和次数也不尽相同。未来可探索促进沙塘鳢属鱼类性腺发育的关键环境因子,提高雌性个体的绝对怀卵量,明确催产药剂种类及剂量,实现催产针注射1次,减少对亲本的伤害。②关于沙塘鳢属鱼类营养需求和人工配合饲料的研究甚少,仅靠天然饵料无法满足规模化养殖的需求。之后可通过营养生理学和分子生物学等技术手段,获得沙塘鳢属鱼类的营养需求,进而深入讨论环境因子对其营养需求的影响,研发配套的人工饲料。③目前沙塘鳢属鱼类野生资源的急剧衰退和市场需求的不断增长,培育出生长速度快、抗病力强的新品种是大势所趋。应加强对沙塘鳢属鱼类遗传育种和分子生物学的研究,将种质筛选、良种选育、遗传多样性分析等与人工繁育相结合,以期早日实现沙塘鳢属鱼类规模化人工繁育。
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