HEPES是Good的缓冲试剂，中文叫N-2-羟乙基哌嗪-N'-2-乙磺酸。它的酸碱度缓冲范围在6.8和8.2之间。Hepes在其他任何溶剂中都很难溶解，但在水中很容易溶解，HEPES与多价金属离子之间没有沉淀反应。此外，大多数自然因素不会影响HEPES的解离，如温度、浓度、培养基含盐量、离子组成等。，说明HEPES很稳定。
需要注意的是，HEPES缓冲液的最终浓度为10-50mmol/L，因此对细胞没有毒性。一般情况下，当HEPES浓度为20mol/L时，可以达到缓冲容量..HEPES缓冲液的两种使用方法介绍如下:
第一种使用方法是将HEPES按一定浓度直接加入到制备好的培养液中，然后过滤、灭菌。每1000ml培养液中加入2.38g HEPES缓冲试剂，溶解后用1N氢氧化钠调PH值至7.2，过滤灭菌后正常使用。此时，HEPES生物缓冲液的浓度为10摩尔/升..
在第二种应用方法中，通常在使用前取99毫升培养液，然后加入1毫升储存液，溶液的应用浓度仍为10毫摩尔/升..将23.8克HEPES溶于90毫升双蒸水中，用1N氢氧化钠调pH至7.5-8.0，然后用水定容至100毫升，过滤灭菌，装入2毫升小瓶。贮藏条件为4℃或-20℃。这就是如何制备l mol/L(100 x)HEPES储存溶液。
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