分化时间是当前宏观进化分析中的热点,它以特定群体的化石记录为参考点,通过基因序列与分子钟的分歧程度,以恒定的速率估计分支之间的分歧时间,并计算进化树中其他节点的出现时间,从而推断出相关群体的起源时间和不同群体的分歧时间。这里有一个重要的概念,分子钟:一个特定的生物大分子(蛋白质或DNA)在所有的进化谱系中都有恒定的进化速率。其中,进化谱系是指不同的群体。
目前,微分时间分析的软件有很多,比如beast2和paml软件包中的mcmctree和mega。
今天我给大家介绍一下如何用beast2分析分化时间。
Beast2软件:
下载地址:http://www.beast2.org/
测试数据:由软件提供的数据集
具体操作步骤:
1.软件安装(已编译,可下载运行)
2.安装相关软件包(解决其他生物学问题)
文件—管理包—不在对话框中
根据自己的需要安装
3.序列导入
文件-导入对齐-从对话框中
4、链接/取消链接分区模型
通常,在分析中,导入比对的基因序列信息,但在某些情况下,也有分区。如果是联合进行分析,需要Link,不需要unlink。
5.替代模型设置
核苷酸替代模型可以选择GTR、HKY、JC69和TN93。这里使用HKY作为替代模型,伽马类别计数通常可以设置为4-8,这里选择4。其他参数,如替代率,形状和频率在分析中进行了估计。
6.分子钟
点击时钟模型,包括严格时钟、放松时钟指数和放松时钟日志正常等。在这里选择严格时钟,不考虑模型中分支之间的变化率差异。
7.先验信息设置
单击优先树优先:圣诞模型其他默认值。
差异化时间设置:
“优先”列底部有一个“+”按钮。点击【确定】,出现下图:
在分类单元集合标签中自定义一个名称:例如,化石信息。然后选择两个需要校准散度时间的物种,移动到右边界。
现在需要在校正节点上设置先验分布信息。首先,单击单系并从下拉菜单中选择正常([无])
然后设置散度时间,智人与潘的散度为5-7My,正态分布中心点设置为6My,标准差为0.5My如图:
注意:您可以设置多个发散时间并重复此步骤。
8.MCMC选项设置
点击MCMC
跑链长度:1000万(默认1000万步,可根据实际情况调整)
Tracelog:链长每1000次取样一次
屏幕日志:运行1000次,打印到屏幕上一次
Treelog.t:tree:运行1000次打印拓扑结构树
在步骤8的操作中,由于设置的链长为10,000,000次,因此在tracelog和treelog.t:tree等输出结果文件中会有10,000,000/1,000 = 10,000个采样值等信息。具体的输出结果取决于它们自己的设置信息。
注:根据设定的运行链长度(假设1000万次)
采样频率太小,会输出大量无用信息,增加运行时间;
如果采样频率太高,输出的有用信息太少,会影响后续分析。
这里设定的是1000倍,相对适合总跑链长度。
9.保存xml文件
单击文件—另存为定义输出文件的名称,生成一个可扩展标记语言文件
10.如果是linux系统,运行。/beast生成如下对话框,并导入要运行的XML文件。
命令行模式:nohup。/beast -threads线程数test . XML & amp;
其他系统文件导入类似:
11.结果评估
结果生成三个文件:日志文件(*)。日志)、树文件(*。树)和xml状态文件(*。状态)。
可以通过trace(软件)查看日志文件,判断结果是否收敛。
跟踪软件下载地址:
http://tree.bio.ed.ac.uk/software/tracer/
主要观点:1。ess2、追踪
12.分化时间
使用beast软件包中的treeannotator进行评估。
单击树注释器打开对话框:
设定燃烧百分比:50;这里:50;后验概率极限:0.0;目标树类型:最大分支可信度树;节点高度:平均高度
输入树文件:树文件(*。树)由主程序运行生成
输出文件:输出文件的名称
设置好之后,点击Run,最后你会得到一个主要包含微分时间的树形文件(NEXUS格式)。
13.检查
软件figtree可以查看上一步生成的树文件。
Figtree软件下载地址:
http://tree.bio.ed.ac.uk/software/figtree/
如图,智人与pan的分歧时间设定为5-7My,手术后时间为592.62万年。
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