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瘦肉精图片 含瘦肉精的加拿大猪肉,你敢吃吗?

据海关通报显示,南京海关今年6月3日在一批加拿大输华猪肉产品中检出莱克多巴胺(瘦肉精)残留,生产企业名称为Frigo Royal (1998) Inc.,企业注册号为94。

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当饲料中添加剂量为治疗剂量的5~10倍时,会改变养分代谢途径,促进营养成分由脂肪向肌肉转移,

瘦肉量可以增加10%以上

,经济回报高,又具有一定的检测欺骗性。

含瘦肉精的加拿大猪肉,你敢吃吗?

*图片来源网络

尽管常规剂量的瘦肉精类药物可在机体内被代谢并排出体外,但过量摄入莱克多巴胺,人体会出现不同程度的中毒反应,其症状与动物中毒症状相似,表现为

肌肉震颤、四肢麻痹、心动过速、心律失常、腹痛、肌肉疼痛、恶心眩晕等症状,重者可引发高血压、心脏病甚至死亡

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由于莱克多巴胺在进入机体后经过代谢,会形成不同的代谢产物,在进行组织、血清或尿液高效液相色谱检测时具有一定的欺骗性,有时会因为阳性证据不足导致漏检。

因此从源头上进行控制,对饲料中莱克多巴胺进行检测和监控不失为控制莱克多巴胺滥用的良好途径。

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目前对饲料中莱克多巴胺的检测方法主要为酶联免疫法(ELISA)、胶体金层析法(GICA)、高效液相色谱法(HPLC)及气相色谱-质谱法(GC-MS)。

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*图片来源网络

ELISA

通常作为筛选方法,即进行定性分析,检测限为0.01 mg/kg,线性范围通常在0.005~0.05 ng。

胶体金免疫层析法

也是一种适合于大规模筛选的检测方法,检测限可以达到5 ng/kg。

HPLC

是最为常用的实验室莱克多巴胺定量检测方法,检测限为0.1 mg/kg,线性范围通常在2.5~10 ng之间。

GC-MS法

是定性和定量分析方法,并且在国内外都被作为莱克多巴胺检测的仲裁方法,其定量限为0.05 mg/kg,线性范围为0.05~1.0 ng。

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*图片来源网络

不同检测方法具有不同的前期处理方式,样品前期处理会对检测结果造成影响:

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随着分析技术的日趋成熟,对莱克多巴胺的分离和鉴定渐趋简化。

而前处理时间几乎占据整个分析时间的80%,是决定分析测定效果的关键。

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适当的和标准化的样品前处理对于获得相同方法之间的一致性和不同检测方法之间的匹配性具有非常重要的意义。

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酶联免疫法是目前进行大规模莱克多巴胺检测最为常用的方法。

酶联免疫法样品的前处理比HPLC和GC-MS简单一些,通常是利用

乙酸乙酯

甲醇

进行萃取和溶解。

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*目前ELISA法检测饲料中的莱克多巴胺只有地方标准,尚没有统一的国标法可以参考。

在用于ELISA检测方法的样品前处理过程中需要注意的问题是:

对样品溶解及萃取过程振荡或涡旋要充分;在转移有机相的过程中要避免吸入脂肪层。

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伯腾仪器 酶标仪

BioTek ELX800 ELISA

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利用胶体金免疫层析法快速检测饲料中的莱克多巴胺是近几年发展起来的非常有市场前景的一种方法,目前也有商品试剂盒出售。

但由于莱克多巴胺出现时间较短,饲料中的莱克多巴胺检测尚处于起步阶段,没有统一的国标法及地方标准可以参考。

而且抗原抗体反应是特异性很强的免疫反应,样品处理不当可能会减少特异性,进而增加假阳性率。

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胶体金免疫层析法检测莱克多巴胺的前期处理比ELISA方法简单一些,无需洗板机等特殊仪器设备。

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需要注意的是:

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高效液相色谱法是目前对莱克多巴胺进行定量分析的最常用方法。

用于HPLC检测对检测样品的要求较高,因此饲料样品前处理比ELISA法和胶体金免疫层析法要复杂的多,包括

试样提取、试样净化和定容

等步骤。

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*具体操作方法可以参考GB/T 20189—2006。

莱克多巴胺属于苯酚型β2-受体兴奋剂,易溶于稀酸溶液和碱性溶液,

其提取方法可以用稀酸溶液提取,也可以用有机试剂提取。

采用2%的氨水甲醇溶液进行提取,用氨水进行碱性化后,可以有效去除脂肪和非极性杂质,从而保证甲醇提取杂质相对较少。

由于是作为定量方法,因此需要注意

实验室内平行测定间的相对偏差不大于10%;而不同实验室间测定的相对偏差应不大于15%。

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气相色谱-质谱法是目前公认的定性和定量方法,除作为普通检测方法外,当免疫学方法与HPLC等方法检测结果发生冲突时,用来作为仲裁方法。

与HPLC方法相比,GC-MS方法样品前处理同样包括

试样提取

试样净化

两个步骤。由于增加了质谱法,因此净化步骤结束后还包括一个

试样衍生

过程。

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在GC-MS检测过程中,需要注意莱

克多巴胺存在4种光学异构体,用柱子分离光学异构体确认有复数峰时,应以各峰高或峰面积的和计算。

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但无论采取哪种检测方法,在操作过程中尽可能去除脂肪和杂质的影响,这样将有利于提高检测结果的重复率和不同检测方法的匹配性。

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