细胞消化的新时代——胰蛋白酶溶液
冷冻胰酶的时代已经过去了
细胞消化的方法通常分为酶法,如胶原酶、胰蛋白酶、伏隔核酶、Accutase等。、以及非酶消化液,如乙二胺四乙酸、一氧化氮酶、非酶消化液等。其中胰蛋白酶是胰腺分泌的蛋白水解酶,实验室常用于贴壁细胞的消化。
胰蛋白酶作用于赖氨酸或精氨酸的C端,在37°C时效率最佳,因此预热的胰蛋白酶可以加速细胞分离。而传统的胰蛋白酶溶液会在较高的温度下自行消化,导致酶活性下降,最终导致无效的细胞分离。因此,传统的胰蛋白酶溶液必须冷冻并储存在-20℃
不经冷冻保存的胰蛋白酶
胰蛋白酶溶液是专门设计使用类似于标准胰蛋白酶的方法进行细胞分离,但不需要包装、冷冻和解冻,因此节省了大量时间和冰箱空。StableCell胰蛋白酶溶液建议储存在2-8℃,但研究结果表明,即使储存在37℃,90%以上的酶活性和性能仍可保持
胰蛋白酶溶液已被证明适用于许多细胞类型,如SKOV-3、DU145、HEK293、16HBE41o-、HL-1和MDCK细胞系等。,并具有与默克标准胰蛋白酶相同的优异性能。
特点和优势
1.节省时间:不需要分装和反复冻融操作
2.储存方便:2-8°C储存,不用的材料可以简单的存放在冰柜里。
3.卓越的品质:在GMP质量管理体系下生产
储存在2-8℃的稳定细胞仍能保持高活性
稳定细胞具有良好的细胞解离效果
干细胞传代的新突破
与人类多能干细胞(包括胚胎干细胞和诱导多能干细胞)传代相关的一个常见问题是不希望的自发细胞分化。没有人工干预,分化细胞增殖迅速,最终降低干细胞培养的整体质量。
传统的干细胞解离方案大多使用温和的解离试剂,如Dispase、Accutase或Accumax。然而,这些传统方法存在一些缺点,如含有动物源性成分,批次间一致性差,需要ROCK抑制剂等。,并且具有应用局限性,仍然不能解决干细胞传代的问题。
干细胞传代试剂是一种专利的无酶、化学定义的干细胞解离试剂,它只选择性地通过未分化的多能干细胞,避免了人工细胞群体筛选或细胞刮除的步骤,从而在不使用ROCK抑制剂的情况下产生高细胞活性。EZ-LiFT还可以保存高度分化的诱导多能干细胞培养物。
不同解离溶液特性的比较
不同干细胞解离试剂对人诱导多能干细胞形态的影响
利用EZ-LiFT试剂选择性分离和传代未分化细胞人诱导多能干细胞
EZ-LiFT试剂可保存高度分化的人胚胎干细胞/iPSC培养物
细胞消化技能和问题解决
细胞消化是细胞研究实验室非常基础和关键的实验操作,但要成为专家并不容易。在实际操作过程中,你可能会遇到各种奇妙的问题,所以掌握一些技巧,提前积累经验是非常重要的。
细胞消化
也就是说,培养分离的细胞,
自然是必不可少的
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