1.什么是单克隆抗体技术？
在抗原的刺激下，B淋巴细胞可以分化增殖，形成针对该抗原的特异性抗体。B细胞的能力和数量有限，不可能连续分化增殖，所以产生免疫球蛋白的能力极小。该B细胞与非分泌性骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，并进一步克隆。该克隆的杂交瘤细胞既具有无限分裂肿瘤细胞的能力，又具有产生特异性抗体B淋巴细胞的能力。通过将克隆的杂交瘤细胞培养或注射到小鼠腹水中，可以获得大量高效且单一的特异性抗体。这项技术被称为单克隆抗体技术。
2.单克隆抗体过程
1)免疫脾细胞的制备纯Balb/c小鼠多用于制备单克隆抗体。免疫方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备，也可采用脾内直接免疫。
2)骨髓瘤细胞的培养和筛选融合前，骨髓瘤细胞应通过含8-AG的培养基进行筛选，以防止细胞发生突变，恢复HGPRT的活性(恢复HGPRT活性的细胞不能在含8-AG的培养基中存活)。骨髓瘤细胞在含10%小牛血清的细胞培养瓶中培养，融合前24小时更换溶液，使骨髓瘤细胞处于对数生长期。
3)细胞融合的关键
A.技术错误经常导致聚变失败。例如，在供体淋巴细胞中没有检测到免疫反应。这是注定要失败的。
b .融合试验最大的失败原因是污染，融合成功的关键是提供一个清洁的环境和合适的无菌操作技术。
4)应尽快进行阳性克隆的筛选。通常第一次检测在融合后10天进行，容易过早出现假阳性。检测方法应灵敏、准确、简便、快速。具体应用方法应根据抗原的性质和单克隆抗体的功能选择。常用的方法有RIA、ELISA、免疫荧光法。其中ELISA最简单，RIA最准确。阳性克隆的筛选要进行多次，只有当所有克隆都是阳性时，才能鉴定为阳性克隆进行扩增。
5)克隆克隆的目的是获得一个单细胞系群体。克隆要尽早进行，反复筛选。这是因为最初的杂交瘤细胞不稳定，容易丢失染色体。反复克隆后可获得稳定的杂交瘤细胞系。
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