透射电子显微镜原理
目前主流的透射电镜管由电子枪室、6 ~ 8级成像透镜和调查室组成。阴极灯丝在灯丝加热电流的作用下发射电子束,电子束在阳极加速高压的加速下高速下移。电子束通过第一聚光器和第二聚光器的会聚作用聚焦在样品上,穿过样品的电子束通过物镜、第一中心镜、第二中心镜和投影镜扩展,在荧光屏上形成图像。电子显微镜的总放大倍数是四级放大透镜放大倍数的乘积,因此透射电子显微镜具有更高的放大倍数。
扫描电子显微镜原理
扫描电子显微镜的设计思想和工作原理早在1935年就提出来了。1942年,英国首次制造出实验室用的扫描电子显微镜。但由于成像分辨率差,拍摄时间过长,实用价值不大。经过各国科学工作者的努力,特别是随着电子工业技术的不断发展,1956年开始生产商用扫描电子显微镜。近几十年来,扫描电镜在生物、医学、冶金等学科中得到了广泛的应用,促进了相关学科的发展。
一、扫描电子显微镜的特点
与光学显微镜和透射电子显微镜相比,扫描电子显微镜具有以下特点:
可以直接考察样品外观的结构,样品的尺寸可以大到120毫米×80毫米×50毫米。
样品制备过程简单,不需要切片。
样品可以在样品室中在三度空之间平移和旋转,因此可以从各个角度研究样品。
景深大,图像富有立体感。扫描电子显微镜的景深比光学显微镜大几百倍,比透射电子显微镜大几十倍。
图像扩展尺度广,分辨率比较高。可以扩大十几倍到几十万倍,基本包括从放大镜、光学显微镜到透射电子显微镜的扩大尺度。分辨率介于光学显微镜和透射电子显微镜之间,可达3纳米。
电子束对样品的损伤和污染较小。
在调查和描述中,从样品中公布的其他信号也可以用于微区成分分析。
二.扫描电镜的结构和工作原理
结构
1.镜头筒
镜筒包括电子枪、聚光器、物镜和扫描系统。效果是发射出一束很细的电子束,电子束在样品表面扫描,各种信号一起激发。
2.电子信号采集和处理系统
在样品室中,扫描电子束与样品相互作用后,会产生各种信号,包括二次电子、反向散射电子、x光、吸收电子、俄歇电子等。上述信号中,zui为一次二次电子,是入射电子激发的样品原子中的外层电子,在样品表面以下几nm到几十nm的区域内进行攻击,其攻击速率主要取决于样品的描述和组成。一般来说,扫描电子图像是指二次电子图像,它是研究样品形貌跟踪的有用电子信号。探测器探测二次电子的探头是一个点火器。当电子撞击到点火器时,1会爆发出光,光通过光导传输到光电倍增管。光信号会转换成电流信号,电流信号经过前置放大和视频放大转换成电压信号,再经过zui后送到显像管栅极。
3.电子信号的出现和记录系统
扫描电子显微镜的图像显示在阴极射线管上,并由照相机记录下来。有两个显像管,一个用于调查,分辨率低,余辉长;另一种是短余辉管,用于摄影记录,分辨率高。
4.True 空系统和电源系统
SEM的真空系统由机械泵和油分散泵组成,其作用是使镜筒内的真空度为10-4 ~ 10-5托。电源系统提供每个组件所需的特定电源。
工作原理
从电子枪阴极宣布的直径为20微米~ 30微米的电子束,受到阴极和阳极间加速电压的作用,射向透镜镜筒,通过聚光镜和物镜的会聚效应,缩小为直径约几纳米的电子探针。在物镜上部扫描线圈的作用下,电子探针对样品外表面进行光栅扫描,激发各种电信号。这些电信号由相应的检测器检测,放大并转换成电压信号,经整流后送到显像管栅极,调制显像管的亮度。显像管中的电子束也在屏幕上以光栅形状扫描,这种扫描运动与电子束在样品表面的扫描运动严格同步,从而获得与接收信号强度相对应的对比度的扫描电子图像,它反映了样品表面的跟踪特性。第二节扫描电镜生物样品的制备技术大多数生物样品含有水分,比较柔软,因此在扫描电镜调查前应对样品进行相应的处理。制备扫描电镜样品的主要要求是样品的外部结构应尽可能保持完好,无变形和污染,样品应干燥并具有优异的导电性。
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