亚硝酸盐的测定 超级干货！食品中亚硝酸盐的检测方法你都知道吗？

分光光度法测定

分光光度法测定亚硝酸盐占有重要地位。目前，除了经典的Grice试剂比色法及其改进方法外，关于分光光度法测定亚硝酸盐的研究也有一些报道，如催化(褪色)分光光度法、流动注射体系-分光光度法、顺序注射体系-分光光度法、导数分光光度法等。分光光度法主要有三种:可见分光光度法、紫外分光光度法和红外分光光度法。

可见分光光度法

苯胺-萘酚分光光度法测定水样中的亚硝酸盐。其原理是苯胺和亚硝酸盐在盐酸介质中重氮化，然后在NaOH溶液中与A-萘酚反应生成橙红色的偶合产物。实验结果表明，偶联产物的最大吸收波长为480纳米，线性范围为0 ~ 0.96毫克/升，线性相关系数为0.9976，表观摩尔吸收系数为ε 480 = 2.530× 103升·摩尔-1·厘米-1，最低检出限为0.08毫克/升。而且所用试剂稳定，毒性相对较低，因此该方法取得了令人满意的结果。

Grice试剂比色法通常用于测定肉制品中亚硝酸盐的含量。结果表明，该方法选择的最大吸收波长为550纳米，相关系数为0.9995，线性良好。在此基础上，对Grice试剂比色法进行了改进。如用改进的Grice试剂比色法测定辣椒酱中的亚硝酸盐含量。在弱酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化，然后与N-1-萘乙二胺偶联形成紫红色染料。最大吸收波长为538nm，NO2-含量在0 ~ 25 μ g/ml范围内符合比尔定律。线性回归方程的相关系数为0.9980。该方法回收率高，重现性好，操作简单，适合批量测定。

流动注射分光光度法也可用于测定食品中的硝酸盐或亚硝酸盐。该方法操作简单快捷，大大提高了工作效率，降低了分析人员的劳动强度，特别适合大规模样品分析。

紫外分光光度法

采用紫外分光光度法测定肉制品中亚硝酸盐的含量。在酸性条件下，亚硝酸盐与间苯二酚和氧化锆离子反应形成有色螯合物。建立了一种简单快速测定食品中痕量亚硝酸盐的方法。猪肉、午餐肉、火腿肠和香肠中亚硝酸盐的回收率均在90%以上。该分析方法简单、快速，干扰少，选择性好，显色反应产物稳定性高，是测定肉制品中亚硝酸盐的理想方法。

导数法和紫外分光光度法的结合拓宽了紫外分光光度法测定硝酸盐和亚硝酸盐的领域。导数分光光度法是根据光的吸收对波长求导形成的光谱进行定性或定量分析的方法。特定光谱导数法最早是由萨利纳斯等人于1990年提出的。该方法灵敏、快速、简便，具有明显的选择性。高阶导数可以区分重叠光谱，甚至提供“指纹”特征，因此特别适合于消除干扰和成分的同时测定，尤其适合于食品分析中混合成分的测定。

催化(褪色)分光光度法

催化(褪色)分光光度法的原理是基于稀磷酸溶液中亚硝酸根催化埃文蓝氯酸钾的氧化还原反应和硫酸介质中亚硝酸根催化氯酸钾氧化吡啶橙的褪色反应。该方法适用范围广、无毒、灵敏度高、选择性好、制备简单、操作方便，改变了现行国家标准中使用α-萘胺致癌物作为显色剂的不利现状。一般来说，影响催化(褪色)分光光度法的主要因素是酸度、反应温度、反应时间、溴酸钾和吡啶的用量以及其他共存离子。

催化分光光度法也适用于水中痕量亚硝酸根的测定。

示波极谱法

示波极谱分析是指在特殊条件下，通过测量电解过程中获得的电流-电压曲线，进行定量和定性分析的电化学方法。示波极谱法是一种极谱新技术，具有灵敏度高、适用范围广、检出限低、测量误差小等优点。示波极谱法的原理是在弱酸性条件下，亚硝酸盐和对氨基苯磺酸经蛋白质沉淀和脂肪去除后，再与8-羟基喹啉偶合，在弱碱性条件下合成染料。偶合染料在汞电极上还原产生电流，电流与亚硝酸盐浓度成线性关系，可用标准曲线定量。示波极谱法采用三电极体系，即滴汞电极为工作电极，饱和甘汞电极为参比电极，铂电极为辅助电极。应注意严格控制显色条件、8-羟基喹啉溶液的制备和样品的预处理。

用单扫描示波极谱法测定香肠中亚硝酸盐的含量，结果与分光光度法基本一致。该方法的检出限为3×10-9g/mL。

荧光分析

荧光分析是光谱分析的一种。荧光分析的原理是亚硝酸盐与过量对氨基苯磺酸重氮化后，剩余的对氨基苯磺酸与荧光胺反应，形成稳定的荧光团和非荧光水解产物。在436纳米的激发波长和495纳米的荧光波长下，荧光强度与对氨基苯磺酸的量成正比。对氨基苯磺酸的原始量和重氮化后过量的对氨基苯磺酸的差值，就是对氨基苯磺酸与亚硝酸盐反应的量，然后计算亚硝酸盐的含量。该方法的优点是灵敏度高、选择性好、样品用量少，不受枪液本身颜色和浊度的干扰，也不受样品稀释度的影响；但操作复杂，对环境因素敏感，干扰因素多，适用范围不广。

离子色谱法

离子色谱是液相色谱的一种。例如，用离子色谱法同时测定苹果汁中亚硝酸盐、硝酸盐和硫酸盐的含量。离子交换层析柱，30毫克/升氢氧化钾为流动相，自动再生抑制电导检测器ASRS-4毫米，该方法具有良好的线性和重复性，相关系数为0.9996，相对偏差小于3%，回收率为97.0%。

185 1827 3196

139 1155 3655