盐酸多柔比星脂质体 CDE发布《盐酸多柔比星脂质体注射液仿制药研究技术指导原则（征求意见稿）》

由于特殊注射剂的复杂特性，需要单独考虑产品开发和评估的关注点和要求。因此，为每个品种制定相应的指导原则，可以更有效地指导仿制药的研发，加快仿制药的审批上市和一致性评价。为明确特殊注射剂化学仿制药的研究思路和技术要求，服务申请人开展具体品种的相关研究工作，经与专家和行业广泛调研讨论，药品审评中心组织起草了《盐酸多柔比星脂质体注射剂仿制药研究技术指导原则(征求意见稿)》。

盐酸多柔比星脂质体注射剂仿制药研究技术指南

一.概述

盐酸多柔比星脂质体注射剂是采用硫酸铵梯度法将盐酸多柔比星包裹在聚乙二醇化脂质体中形成的特殊注射剂。

本指导原则根据盐酸多柔比星脂质体注射剂的制备特点，提出了仿制药开发中药学研究、非临床研究和生物等效性研究的技术要求，旨在为仿制药的开发提供技术指导。

本指导原则仅代表药品监管部门对本产品的当前观点和理解。根据现行法律法规的要求，可以采用替代研究方法，建议提供详细的研究数据或与监管部门沟通。

二、整体研究思路

参照制剂作为仿制药，应当按照国务院发布的《化学仿制药参照制剂的选择和测定程序》进行选择。

盐酸阿霉素脂质体注射液是一种通过静脉注射给药的脂质体制剂。根据产品的特点，应采取循序渐进的比较研究策略。首先，应该对仿制药和参考制剂进行药学和非临床的全面比较研究。然后进行人体生物等效性研究。必要时进行临床研究。如果药学研究和/或非临床研究的结果表明仿制药与参考制剂不一致，建议优化后重新开始研究。

作为注射用仿制药，除满足仿制药注册申报要求外，还应符合《化学注射用仿制药(特殊注射液)质量与疗效一致性评价技术要求》等。

三.技术要求

(a)制药研究

1.处方

仿制药的处方应与参比制剂一致，辅料的种类和用量通常应与参比制剂相同。

氢化大豆磷脂酰胆碱(HSPC)、胆固醇和甲氧基聚乙二醇磷脂酰乙醇胺(MPEG-DSPE)是本产品的关键成分，应按相关要求进行注册和相关，或由制剂注册申请人提供研究数据。仿制药应选择来源相同(天然或合成)的脂质赋形剂作为参考制剂，建立严格的内部控制标准，并提供研究数据证明仿制药中使用的脂质赋形剂与参考制剂中的脂质赋形剂相似(如各组分的比例)。

2.准备过程

应采用硫酸铵梯度法制备。主要步骤包括:1)制备空白色脂质体，2)形成硫酸铵梯度，3)负载活性药物。通过脂质体内外相硫酸铵浓度梯度驱动阿霉素扩散到空白色脂质体中，实现活性药物的装载。

该产品工艺复杂，需提供详细的生产工艺开发研究数据和工艺验证数据(包括无菌工艺验证数据)。建议制定合理的生产过程控制策略，如关键步骤的生产时限、关键中间体的质量控制标准、保持时限等。

要特别注意生产工艺和批次对产品质量可控性的影响，注册批次和商业批次的生产工艺和批次原则上要一致。

3.质量研究

仿制药应在体外进行表征，以证明其符合参考制剂的关键质量属性。除了注射剂的一般质量属性外，还应注意以下质量保证:

1.脂质体组成:包括磷脂含量、游离和包封药物含量、总硫酸根和铵浓度、内相硫酸根和铵浓度、组氨酸浓度和蔗糖浓度。应选择合适的方法来研究和计算药物-脂质比率。仿制药的各项指标应与参考制剂一致。

2.包封药物的状态:药物主要以硫酸多柔比星沉淀的形式存在于脂质体中，因此应选择合适的方法进行研究(如电镜、X射线衍射等)。)，仿制药应与参比制剂一致。

3.脂质体内部环境:包括内相体积、内外相之间的pH梯度差、内相中硫酸根和铵的浓度。应选择合适的方法进行研究，仿制药的所有指标应与参考制剂一致。

4.体外释放度:体外释放度是本品的重要质量控制指标，因此应选择合适的条件和方法进行研究，仿制药应与参考制剂一致。

5.脂质体形态和脂质膜层:脂质体的载药和释放速率可能受脂质体形态和脂质膜层的影响，因此应选择合适的方法(如电镜)进行研究，仿制药应与参考制剂一致。

6.脂质膜的相变温度:脂质膜的相变温度影响脂质体双层膜的稳定性，因此应选择合适的方法进行研究(如差示扫描量热法)，仿制药应与参比制剂一致。

7.粒度和粒度分布:粒度和粒度分布是本产品的重要质量控制指标。应选择适当的方法进行研究，仿制药的粒度分布(D10、D50、D90)应与参考制剂一致。同时建议以D50和SPAN[(D90-D10)/D50]或多分散系数为基础，采用人群生物等效性研究的分析方法比较粒径和粒径分布(仿制药和参比制剂分三批选择，每批不少于10瓶，每瓶平行测定不少于三次)。仿制药和参比制剂应等同。

8.聚乙二醇厚度(脂质体表面的聚乙二醇密度):磷脂酰乙醇胺(DSPE)用甲氧基聚乙二醇(MPEG)改性，可以增加脂质膜的机械强度。另一方面可以避免单核吞噬细胞系统(MPS)对脂质体的清除，从而增加其在血液中的循环时间。应选择合适的方法进行研究，仿制药应与参考制剂一致。

9.ζ电位:表面电荷可以维持脂质体的稳定性，同时影响脂质体的组织分布、细胞摄取和清除。研究应选择合适的方法和介质，仿制药应与参考制剂一致。

10.各种条件下的体外渗漏:为了保证肿瘤细胞等量给药，需要模拟体内环境条件进行药物渗漏研究，推荐的试验条件如下表所示:

应提供各种比较研究中使用的分析方法和必要的方法验证数据，并规定评价指标、标准和测定依据。

建议至少将三批商业规模工艺生产的仿制品与几批参比制剂进行体外比较。

4.稳定性研究

应进行常规稳定性检查，并结合产品规格进行使用中的产品稳定性研究。除了普通注射用cqa外，稳定性指标还应包括与微粒制备相关的cqa。

产品特性、稳定性、包装材料的相容性、容器的密封性等方面的研究成果要结合起来，证明包装材料的选择是合理的。包装材料的兼容性应参照相关指导原则进行。

(2)非临床研究

通常有药物释放过程、特殊注射进入体内后体液成分吸收等因素。因此，仿制药和参比制剂在处方和工艺上的差异可能会导致体内药代动力学行为的变化，从而带来有效性和安全性的变化。建议在非临床阶段选择合适的动物物种，研究仿制药相对于参比制剂的药代动力学和组织分布，充分表明仿制药与参比制剂药代动力学行为的一致性，并在此基础上进行制剂安全性试验。同时鼓励建立普通阿霉素对照组，确认阿霉素脂质体制剂与普通阿霉素注射液在动物体内的药代动力学特征差异。

1.通常选择非啮齿动物进行药代动力学比较研究。根据拟定的临床剂量和给药途径，设立参比制剂组，测定血浆中阿霉素总含量和游离阿霉素浓度，获得t1/2、Cmax、AUC、Vz、Cl、MRT等主要药代动力学参数的对比研究结果。鉴于只有释放的药物才能在体内发挥其活性，在测定血药浓度时，有必要分别考察结合药物和释放药物的暴露情况。

2.利用荷瘤动物进行组织分布的对比研究，剂量通常设定为有效剂量。至少测定给药后血液、肿瘤组织、心脏和富含内质网的组织(如肝、肾)中的药物浓度，比较正常组织与肿瘤组织和血液中阿霉素药物暴露的差异及其比值。同时成立参比制剂组，比较仿制药和参比制剂在体内主要组织中的分布差异。

3.根据相关指导原则进行制剂安全性试验，并建议与参考制剂进行比较。

(3)人体生物等效性研究

研究类型:空腹部试验。如果患者的健康状况不允许禁食，主办方可以在研究期间提供非高脂肪餐，或者可以在标准(非高脂肪餐)早餐后2小时开始治疗。

实验设计:通常采用随机、单剂量、交叉研究设计。

受试者:适合使用本产品进行单一治疗的肿瘤患者。

注意事项:

A.商业批次的样品应用于关键的生物等效性研究。

B.研究将在患者计划接受常规治疗的两天内进行，治疗计划在两个研究周期内不得改变或延迟。

C.患者在其他时间的护理治疗方案除了在研究期间随机使用试验制剂或参照制剂进行治疗外，不应改变。

D.注射剂量为4周1次，连续使用2个疗程。

E.在等效性研究的两个周期中，任何合并用药必须相同。

f由于本品的心脏毒性，应在基线时记录患者的心脏状态。

G.在研究过程中，如果患者的体重变化导致剂量变化达到5%，则必须停止患者的研究，受试者的数据不包括在生物等效性分析的最终BES中。

排除标准:

A.在阿霉素治疗4个疗程后，阿霉素的总暴露量达到550mg/m2或更多。

b肝功能明显受损的患者。

有盐酸多柔比星或RLD处方过敏史的患者。

D.孕期和哺乳期的女性患者。

E.18岁以下或75岁以上的患者。

F.分枝杆菌、巨细胞病毒、弓形虫、卡氏肺孢子虫或其他微生物在骨髓毒性药物治疗条件下的机会性感染。

G.患有严重心脏、肝脏或肾脏疾病的患者。

检测物质:在适当的生物液体中的游离(未包封)阿霉素和脂质体包封的阿霉素。

生物等效性评价指标:应提供包含试验制剂和参比制剂的游离阿霉素和脂质体阿霉素的AUC0-t、AUC0-∞、Cmax几何平均、几何平均比值和90%置信区间。同时，增加脂质体包裹阿霉素的一些暴露指标(如AUC0-48h和AUC48h-last)来考察不同时间段的暴露情况。

生物等效性的接受标准(90%置信区间):AUC0-t，AUC0-∞，游离和脂质体包裹阿霉素的Cmax，脂质体包裹阿霉素的部分暴露指标(如AUC0-48h和AUC48h-last)，几何平均比的90%置信区间值应不小于80.00%且不大于125

其他:除上述药代动力学参数外，其他综合药代动力学参数的个体值和平均值，如峰值时间、消除半衰期、清除率、表观分布体积等。注册和报告时应提供。

(转自CDE:国家药品监督管理局药品审评中心)