膜过滤法梭菌显色培养基（膜过滤法）

梭菌显色培养基(膜过滤法)

琼脂培养基

app应用

用于欧盟指导委员会推荐的水样中产气荚膜梭菌的分离和计数(使用膜过滤法)(3)

背景

产气荚膜梭状芽孢杆菌是一种革兰氏阳性芽孢杆菌，是一种人畜共患病原体，是人和动物肠道的正常菌群。广泛存在于土壤、粪便、污水等自然环境中(1)。产气荚膜梭状芽孢杆菌分为五个亚型，其中一些可以分泌外毒素。产气荚膜梭状芽孢杆菌作为一种条件致病菌，可引起水和食物污染，引起畜禽和人类疾病，如坏死性肠炎、腹泻、肠毒血症、气性坏疽和食物中毒

据报道，大肠杆菌作为水质的微生物指标是不可靠的，而产气荚膜梭菌可用作水污染的指示细菌。欧洲将其作为水质卫生标准的补充条款，WHO将其作为水质检测中污染水质的微生物。产气荚膜梭菌的数量与水污染程度有一定的相关性。根据我国《饮用天然矿泉水食品安全检验国家标准》GB8538—2016，应在天然矿泉水产品和水源水中检测产气荚膜梭菌。

目前检测产气荚膜梭菌多采用培养基法和PCR法。实践证明，采用快速膜过滤技术和彩色介质(mCP介质)简单、易行、可靠。

原理

M-CP版材按艾蒙与付款(2)公式制作。培养基中的胰酶和酵母粉提供氮源营养，蔗糖提供碳源营养。溴甲酚紫作为pH指示剂。吲哚β-D-葡萄糖苷是β-D-葡萄糖苷酶或纤维二糖酶的显色底物，酚酞二磷酸用于检测酸性磷酸化酶。添加D-环丝氨酸和多粘菌素B(FD153)抑制其他伴随菌群。厌氧环境也提供了进一步的选择性。当黄色(纤维二糖酶阴性)菌落暴露在氨气烟雾中30秒后变成玫瑰色时，可认为是产气荚膜梭菌。颜色识别有时很困难，因此可以选择典型菌落(黄色至粉色)和非典型菌落(绿色或未变色)进行验证。验证试验可通过降硫、革兰氏阳性、孢子样、非动力学、硝酸盐还原、明胶液化、乳糖发酵等生化试验(4)进行确认。

中等成分

组成 / 弥补 / 化妆 / 编造 / 和好 / 配置 / 补考 / 铺（床）

35.6克干粉溶解485毫升蒸馏水。加热煮沸使培养基完全溶解。15磅在121℃高压灭菌15分钟。冷却至45-50℃..用5ml无菌蒸馏水溶解添加剂1(项目编号:FD153)，用10ml无菌蒸馏水溶解改良添加剂2(项目编号:FD154A)，在室温下孵育添加剂2(项目编号:FD154)。将一管添加剂1(项目编号:FD153)、一管添加剂2(项目编号:FD154)或改性添加剂2(项目编号:FD154A)加入485毫升无菌溶解和冷却的梭菌显色培养基溶液中，混合均匀，倒入无菌盘中。

质量管理

外观:淡黄色至淡绿色散粉。

成胶性:牢固，相当于1.5%琼脂凝胶。

成品颜色和透明度:紫色透明至微不透明凝胶。

酸碱度:7.40-7.80

培养反应:厌氧条件下添加添加剂后，43-45℃孵育18-24小时，观察接种反应。