移液器在实验室里是不可缺少的,但是重复操作难免出错。因此,优秀的实验者从正确使用移液器开始。
移液器使用技巧
移液器是实验操作中不可缺少的工具。对于顶尖专家来说,重要的是实验误差最小,重复性好,所以要注意移液器的正确使用。
1.影响移液枪精度的因素
(1)温度:室温低时手温高,使空气体膨胀,吸入冷溶液时常出现错误。
(2)气密性:枪尖与枪体的连接处和枪内的气缸长期磨损,造成误差
(3)抽吸速度:容易造成尖端气泡,污染枪头
(4)试剂挥发:吸收高挥发性试剂时,蒸汽进入枪头,内压增大。结果,当液体被压出时,压力增加,导致误差。解决方法:反复吸4-5次即可改善。
2.具体用法
变尖法:最准。
(1)将旋钮调节到所需的刻度位置。提示:先稍微超过,然后摆动到音阶。注意禁止超过最大刻度,避免人为失误。
(2)插尖:无菌操作时,注意动作要迅速正确,不要用手触摸尖,动作的力度要保持一致,禁止无用的动作。正常操作时,可以用拇指和食指拧紧,但不能用手触摸鼻尖。
(3)手指按压第一部分,针尖接触试剂。白尖达到液面1 mm,黄尖2-3 mm,蓝尖2-4 mm,以避免液压引起的误差。
(4)慢慢吸取试剂,禁止液体过快进入枪头。
(5)尖端取出后,轻轻靠在容器内壁上,使尖端外壁上的液体向下流动。
(6)将吸头贴在目标容器内壁上,轻轻压向第一段,将液体压出。
(7)尖端尖端在容器内壁上轻微滑动,在尖端保持少量液体,移出目标容器,用手指移除尖端,并注意不要溢出试剂。
一尖分开注射:不适用于挥发性和毒性试剂。
(1)用上述(1)-(4)的方法,移去液面后,先慢慢压到第一段,再用力压到第二段,将试剂完全压出。
(2)如上述(3)所示,慢慢吸出液体。
(3)将试剂压出至目标容器液体空上的第二阶段。注意与A压力相同,注意试剂不要四处飞溅。
(4)慢慢回到第一段,重复以上操作。达到目标容器原液体不污染针尖的目的。
转移几微升有价值试剂的方法:
(1)用上述(1)-(4)的方法,去掉液面后,在容器内壁轻压几下,使外壁的液体流下。最重要的是白尖低于1 mm。
(2)将tip的尖端浸入目标容器的液面下,慢慢压到第一阶段。
(3)松开,回到第一阶段,再次吸入液体,重复4-5次,清洗尖端内壁的液体。
(4)将tip的尖端移出液面,轻轻靠在内壁上,将液体压出至第二级。
移液卦
1.安装吸头
用力按下移液管套筒的手柄,如有必要,轻轻旋转。
操作错误:用力打梢。这种方法会对吸头造成损坏,甚至会磨损移液器手柄,从而影响其密封性能。
2.装定距离
操作前请选择正确的移液器。移液器可以在10-100%的范围内操作,但在10%的范围内操作需要很高的移液技能,因此建议在35-100%的范围内操作。
范围调整:从小范围调整到大范围时,向所需范围的方向连续旋转,旋转到超过所需范围1/3的位置,再回到所需范围。从大范围调整到小范围时,直接相干旋转到需要的范围。
跑步和洗漱
使用相同的样品重复抽吸和引流两到三次,并在将来为每次抽吸提供相同的接触面,以确保操作的一致性。
注意:请勿用高温或低温液体冲洗!
4.吸头浸入角度
吸液时尽量保持垂直状态,倾斜角不应超过20°。
5.吸头浸入深度
6.吸头浸入时间
吸取后,在液面保持一秒钟,然后轻轻取下吸头,这对于大容量移液器或吸取粘性样品尤其重要。
7.吸入速度
均匀连贯的移液,控制移液速度,过快会造成喷雾、液体或气溶胶冲进移液器,污染活塞等部件。
8.排液和吹气
将活塞压到一档排出液体,稍停后再压到二档吹气。
有四种方式排放液体:
9.手部温度
移液器不宜长时间握在手里,最好挂在支架上或挂在手上晾干。
移液器操作失误及处理
作为液体操作中最常用的手动可调精密移液器,一些错误的操作会给操作本身带来误差,一些会对机器造成损坏,简要总结如下:
错误:组装吸头时,用移液器反复敲击吸头,并将其拧紧
正确:插入吸头,轻轻左右转动,拧紧吸头
分析:撞击会造成移液器内部齿轮组合松动,长期操作会影响移液器精度。
错误:吸头与移液器不匹配,影响气密性
正确:选择与移液器匹配的吸头,保证质量
分析:吸头不匹配主要表现为对气密性的影响。会直接影响移液器的准确度,通常移液操作会少于设定量。
错误:吸液时,移液器倾斜吸液
正确:垂直抽吸
分析:倾斜状态会引起气压面的变化。会影响移液精度。
错误:当吸头包含未插入的液体时,移液器平放在桌面上
正确:将移液器垂直悬挂在移液器支架上
分析:吸头含有不插电液体。移液器平放后,液体可能会流入移液器体内,影响移液器内部组件,造成严重损坏和不良污染。
错误:使用大范围移液器移出少量液体
正确:移液量必须在移液器提供的范围内,以满足不准确和不准确的要求
分析:空气垫是移液器不准确的主要原因。移液器的选择应该是最大范围,最接近目标液体转移体积的选择原则。
错误:吸收高挥发性液体
正确:不建议使用普通移液器转移强挥发性液体
分析:如果必须移除高挥发性液体,在移液完成后应立即拆卸移液管,以蒸发蒸汽。同时,建议使用外部活塞移液器。
错误:吸入速度和排出速度太快
正确:慢吸慢放
分析:对于测量范围为1mL或更大的移液器,快速抽吸很容易导致液体上冲程。过快的排放会增加液体的残留量。
移液管打油诗
移液枪是大众买的,科学使用。记住它
马马虎虎,用烂枪实验停滞。
在使用枪之前,看一下测量范围是很重要的
翻范围。不允许在限制范围内。你可以随意调节
苯酚仿萃取最差。吸枪后,枪头要打掉
不扔枪头不说把枪身倒扣更蠢
枪体原本是一只塑料氯仿腐蚀鸟
EB是一种强致癌物。吸的时候应该戴手套
你为什么不得意忘形,戴着手套拿着枪
因此,EB在不知情的情况下到处污染并伤害他人
用完范围并调整最大值。枪可以持续很长时间
遵守规范是一种公共道德和美丽的环境
(内容来源:嘉峪检测网 ) 为了帮助从事分析测试工作的实验技术人员系统地学习样品前处理技术以及主要处理方法的原理和特点,了解不同学科领域最新的前处理技术。特有多位名师联合编写的【新书上架】样品前处理技术的百科全书来啦!本书既可作为实验技术人员系统学习和培训的教材,也是日常工作中可以经常查阅的必备参考书。接近
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