reporter 百奥赛图科普知识系列—

嗨，下午好，读者朋友们！每当你怀着敬佩的心情阅读CNS文献，看到那些高(武)端(燕)高(柳)气(se)的图，你会不会觉得科研的灵魂在燃烧？各种记者鼠是这些美图不可缺少的一部分。今天，边肖为您带来关于记者鼠的科普知识。

所谓记者鼠，就是把记者基因敲进去的老鼠。td番茄鼠、mT/mG鼠、LacZ鼠、彩虹鼠等。很常见。它们的重要作用是验证各种Cre工具小鼠的特异性表达。简而言之，它们是“工具鼠的工具鼠”:我们在前面介绍的Cre-loxp系统中已经知道了具有特异表达的Cre工具鼠，但是如何验证这种鼠的特异表达呢？以前，报告小鼠被巧妙地设计来指示Cre小鼠的特异性。

B-tdTomatocKI大鼠

td番茄大鼠(SD-gt(rosa 26)tm1(CAG-lsl-td番茄)/bcgen)在ROSA位点敲入CAG启动子、td番茄蛋白编码序列和WPRE序列，并在CAG启动子和td番茄序列之间插入LSL(loxp-3×stop-loxp)序列。如图1所示。

图1。td番茄的目标策略[1]

一般情况下，这种小鼠由于3×stop的存在，不能表达红色荧光。与CRE小鼠或TAM激活的CreT2小鼠交配后，Cre重组酶产生的后代切掉3×stop，表达td番茄，可在Cre或CRET2表达的组织中发出红色荧光，表明基因的位置。图2显示了TDTomotive CKi大鼠的实验结果:

图2。td番茄大鼠与脑特异性表达Cre大鼠交配后后代的组织荧光实验[1]

图中红色的部分是老鼠的大脑，醒目的红色部分是老鼠的海马体。朋友觉得很酷吗？

MT/mG小鼠

mt/mg(Rosa-PCA-loxp-mt-pa-loxp-mg-pa)小鼠在设计上更为精致。这种小鼠组织在被Cre重组前可以在膜上发出红色荧光，被Cre重组后在膜上发出绿色荧光。因此，顾名思义，mT/mG的m表示膜，t表示TDToP，g表示eGFP。为了达到这个效果，在ROSA位点敲除了pCA启动子、一段mT和pA序列、一段mG和pA序列，并在mT和pA序列的两端插入一段loxp位点，如图3所示。

图3。MT/MG小鼠的靶向策略[2]

在正常情况下，这种小鼠表达位于膜上的TD番茄荧光蛋白，mT序列后面的pA信号会强行终止后面序列的转录过程。在Cre重组后，Mt+PaA序列被切除，并表达了下面的mG蛋白。所以你会在成千上万的红色灌木丛中得到一点绿色的效果，如图4所示。这个神奇的特性赋予了它一个特殊的功能:工具鼠标的工具鼠标，即验证各种特定表达工具鼠标的表达位置。

图4。cre重组后的小鼠组织[2]

R26R(LacZ)小鼠

R26R小鼠(ROSA-LSL-LacZ)是由pROSA26-1载体构建的报告小鼠，插入了LSL序列和LacZ序列，如图5A所示。这种小鼠在正常情况下不表达LacZ，用LacZ底物X-Gal染色组织切片不能显色；然而，在通过Cre重组后，因为LSL序列被敲除并且LacZ被表达，当小鼠组织切片用X-Gal染色时，出现蓝色反应，如图5B所示。当然，因为LacZ小鼠只能通过X-Gal显色，所以只适合体外检测。