dmem培养基 你注意到了吗？实验室光照会影响 DMEM 和 FBS 的性能哦！

本文主要研究实验室光照对经典培养基和血清的影响。实验结果表明，光照会对DMEM介质产生有害影响。与未暴露的DMEM培养基相比，暴露的DMEM培养基的细胞产量仅为10~40%，细胞生长能力的下降主要是由于光化学反应产生的有毒物质。胎牛血清对光有很强的稳定性。而且，血清和培养基一起使用时，血清也能在一定程度上保护培养基，使细胞的生长能力不受光照后培养基降解的影响。

实验结果

一个

1.光对DMEM介质性能的影响

在细胞培养之前，将DMEM培养基暴露于特定强度的暖荧光灯下48小时。在每个培养条件下进行三次平行培养，通过细胞计数确定细胞产量。

当培养基暴露于105 dekalux光强时，与对照培养基相比，实验组三种细胞系的细胞增殖水平下降了20% ~ 35%，但在置于半透明黄色袋中的培养基中，细胞生长没有下降趋势(见图1和图2)。

图1光对培养基的影响

注意:

2.光照对胎牛血清性能的影响

在对细胞产量进行实验性评估之前，将胎牛血清在105度光照下暴露24至48小时。之后，通过增加暴露时间来测试胎牛血清的相对稳定性极限。在暴露于105 dekalux 21天后，通过细胞产量试验测量血清的性能。3T3和BHK-21细胞的细胞产量与对照组相似，而AIF细胞的细胞产量略有下降(见图3)

图3光对胎牛血清性能的影响

注:(一)AIF杂交瘤细胞

(二)BALB/3T3细胞

BHK-21 (C-13)细胞。

接下来，将细胞在无光照的DMEM培养基中培养，并加入10%胎牛血清，然后分别测试不同保存条件下对应于血清的细胞产量。对照组血清保存条件为:22℃，避光保存21天；实验组血清保存条件为22℃，暴露于105 dekalux 21天。实验结果表明，辐照后的胎牛血清的细胞培养性能没有明显下降。

克隆率是一个更敏感的实验，用于比较未暴露和暴露血清的细胞培养性能。在暴露于105 dekalux 28天后，胎牛血清的克隆率数据显示细胞培养性能下降(见图4)。

图4光和温度对胎牛血清性能的影响

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结论

一个

当暴露在荧光灯下时，DMEM培养基支持细胞生长的能力急剧下降，这主要归因于两种机制:①维生素B2的光活化导致色氨酸自由基的产生和过氧化物的形成[1，2]，②维生素B2和色氨酸的光加成产物的形成[3]。另外，细胞生长能力的下降与光照剂量有关:光照强度越大或光照时间越长，下降越明显。

此外，我们还研究了实验室光照对胎牛血清的影响。血清的保护作用是由于血清中的过氧化氢酶活性，可以切断自由基介导的反应[1]。但用克隆率衡量细胞培养性能时，血清在光照和室温下长期保存会导致其培养性能下降。

小费

★细胞培养系统一般都是避光覆盖！

★预防措施包括:

①用黄色袋子盖住培养基瓶；

②在储存区和实验室用黄管遮挡荧光，尽量减少培养基和血清在荧光波长范围内的暴露。

★当血清需要长时间暴露于光或反复短期暴露时，也可参考上述预防措施，抑制光的有害作用。

引用的文献

1.过氧化氢作为光产物对人细胞毒性的鉴定。体外14，715-722 (1978)。

2.光诱导色氨酸-核黄素加合物对F9畸胎瘤细胞和植入前小鼠胚胎的毒性作用。国际。《美国营养杂志》58，394- 401 (1988)。

3.王若珍，「日光」萤光在组织培养液中对人体细胞的致死效应。光化学和光生物学21，373-375 (1975)。