刃天青 什么是细胞活性？学习4种常见检测方法

维持实验细胞的正常状态是实验成功的基石。击倒蛋白质表达、药物治疗或特殊细胞培养后，你有没有经历过第一次实验的结果让你特别兴奋，但反复实验后发现偏差，心情一落千丈？它与你样本中死亡细胞的水平有关。这也是我们今天要讲的一个话题——定期检测细胞活动，随时关注细胞状态。即使这组数据对你的项目来说不是必须的，但它是你控制实验的有效手段。

细胞活性是指样本群体中健康细胞的比例。细胞活性的检测是在实验过程中观察细胞生理状态所必需的。细胞活性受环境因素的影响，包括细胞培养参数的变化、药物和生长因子的刺激以及对各种疾病的反应。例如，癌细胞显示出增强的细胞活性，这导致异常的细胞增殖和逃避凋亡。相反，神经退行性和其他组织退行性疾病的特征是进行性细胞丢失。损伤和感染也对细胞存活产生负面影响，导致坏死或凋亡。以上，细胞健康与疾病之间关系的案例警告我们，有必要在不同的实验背景和模型系统中测量细胞活性。

科学家在不同的实验平台上开发了多种检测细胞活动的技术。具体而言，细胞检测可以根据检测原理进行分组，包括细胞增殖、质膜完整性、代谢活性和线粒体功能。除了通过活性检测快速检查细胞群体的整体健康状况，我们还可以满足更深层次的需求，即确定细胞死亡模式——活性受损时的凋亡或坏死。

XTT检测(XTT细胞生存力试剂盒#9095)是一种代谢检测方法，可用于检测细胞活性。在健康细胞中，XTT被线粒体酶转化为橙色染料。然后，通过检测450纳米处的相对吸光度来估计活细胞的数量。这种方法的优点之一是操作简单，不需要细胞固定、渗透或二次检测，分析后可以继续检查细胞。

代谢检测的第二种方法是刃天青试验(细胞活力试剂盒# 11884)。将刃天青试剂加入到细胞培养物中，在健康细胞中，刃天青试剂通过脱氢酶还原为荧光的苯妥英，苯妥英的最终量与样品中的活细胞成正比。与XTT检测类似，用于刃天青检测的细胞也可以继续用于下游分析。

活/死细胞计数检测是评估细胞活性的另一种常用方法。这种检测使用细胞可渗透的活性染料、细胞不可渗透的染料或它们的组合，并标记细胞群中的活细胞和死细胞。比如台盼蓝是一种偶氮染料，不能穿透细胞膜，所以不会进入健康细胞。但膜损伤的死细胞可以吸收锥虫蓝，所以可以用血细胞计数器统计死(蓝)细胞和存活(无色)细胞的数量。

此外，免疫组织化学(IHC)也可以检测细胞活性。这种方法通常用于观察靶蛋白在健康和患病组织中的分布和表达模式，同时确定细胞死亡发生的区域，同时保持组织切片的完整细胞结构。通过使用细胞增殖(包括Ki67或PCNA)或凋亡(包括裂解的胱天蛋白酶-3和PARP)的标记进行定量分析。

评价细胞活性的方法有很多，你最常做的是哪一种？欢迎在评论区留言，让大家交流学习。

另外，在细胞实验中，如上所述，细胞的状态非常重要。为了保证实验结果的一致性，我们可以通过监测细胞活动来保证细胞的健康状态。