大肠杆菌和粪大肠菌群计数一致是食品卫生常规检验。2018年，国际标准化组织发布了ISO 16649-1: 2018的新版本，即“食物链微生物学——β-葡萄糖醛酸酶阳性大肠杆菌的水平计数法”。第一部分采用5-溴-4-氯-3-吲哚β-D-葡萄糖醛酸苷在44℃的膜和菌落计数技术”。
ISO 16649-1:2018取代ISO 16649-1:2001，但有以下修改:
1)环境和初级食品生产阶段的取样
2)TBX培养基(胰蛋白胨胆盐葡萄糖醛酐琼脂)的孵育时间至少应为20小时
3)添加培养基和滤膜的性能测试
4)为安全起见，不再建议用二甲基亚砜溶解葡萄糖醛酸酶的显色底物BCIG
5)调整无机盐改性谷氨酸琼脂的组成
本标准适用于食品、饲料和食品生产车间的环境样品。
在这个过程中，可以分为以下几个步骤:
1)恢复。
用无菌镊子夹一个膜，放在MMGA培养基的干燥表面，避免膜下有气泡。薄膜可以用涂杆弄平。用无菌移液管向膜中心加入1毫升样品溶液，用涂杆将接种液均匀分布到整个膜表面。让平板在室温下静置15分钟，直到整个膜被接种物浸泡。在37℃孵育4小时0.25小时，膜/琼脂表面朝上。
2)分离。
使用无菌镊子将膜转移到TBX培养基中。在44℃培养箱中孵育20 ~ 24小时，蓝色或蓝绿色菌落为葡萄糖醛酸酶阳性大肠杆菌。选择典型菌落数为150的平板进行计数。
3)结果的计算和报告
世界知名的微生物培养基生产商HiMedia提供ISO指定的培养基，如Minerva Ls-Modified谷氨酸盐琼脂(MMGA)，货号M643I，配方与ISO 16649-1:2018完全一致，只需用户自行配制氯化铵即可。对于TBX培养基，HiMedia公司提供了HiCrome大肠杆菌琼脂，货号M1295I，配方与ISO 16649-1:2018完全一致。在该培养基中，大肠杆菌为蓝绿色菌落，沙门氏菌为无色菌落，葡萄球菌被抑制生长(见下图)。
自1975年以来，HiMedia公司致力于微生物培养基和细胞培养基的生产和研发，拥有WHO GMP认证、ISO 9001: 2008、ISO13485:2003认证、ce认证和FDA注册，特别是通过CE体外诊断注册。其产品销往世界140多个国家。
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