“生物实验是高中生物的重要模块,实验设计与分析是学生头疼的问题。今天,边肖给学生们详细总结了高中生物的七个重要实验,以帮助学生们准备和复习实验。喜欢的同学不要忘记和朋友分享。”
实验一:观察细胞内DNA和RNA的分布
实验原理:DNA绿色,RNA红色
分布:真核生物DNA主要分布在细胞核内,线粒体和叶绿体也含有少量DNA;RNA主要分布在细胞质中。
实验结果:细胞核为绿色,细胞质为红色。
实验二:材料鉴定
实验原理:
还原糖红色沉淀+费林试剂砖
脂肪+苏丹III橙
脂肪+苏丹红IV
蛋白质+缩二脲试剂的紫色反应
实验步骤:
1.还原糖检测
(1)选材:还原糖含量高,白色或接近白色,如苹果、梨、白萝卜等。
(2)试剂:费林试剂(溶液A: 0.1g/mL NaOH溶液,溶液B: 0.05g/mL硫酸铜溶液),现已上市。
(3)步骤:将2mL样品溶液放入试管→加入1mL新制备的费林试剂(等混合后加入费林试剂溶液A和溶液B)→水浴加热约2分钟→观察颜色变化(白色→浅蓝色→砖红色)。
2.模拟糖尿病检测
(1)采样:正常人尿液和糖尿病患者尿液。
(2)检测方法:费林试剂(水浴加热)、班克罗夫特试剂或尿糖试纸。
(3)结果:(用费林试剂检测)糖尿病患者尿液在试管中出现砖红色沉淀,正常人尿液未出现砖红色沉淀。
(4)分析:糖尿病患者的尿液中含有还原糖,与费林试剂反应产生砖红色沉淀,而正常人的尿液中没有还原糖,所以没有反应。
3.脂肪检测
(1)材料选择:脂肪含量越高,组织越好,如花生子叶。
(2)步骤:做一片(片越薄越好)把最薄的花生片放在载玻片中央。
(3)染色(将2 ~ 3滴苏丹红ⅲ染料溶液切成薄片→ 2 ~ 3分钟后,将染料溶液吸出→滴加50%体积的乙醇洗去浮色→吸出过量的乙醇)
(4)制作和装载(在料片上滴1 ~ 2滴清水→盖上盖玻片)
(5)显微镜检查和鉴定(显微镜下光→低倍观察→高倍观察)。
4.蛋白质检测
(1)试剂:缩二脲试剂(溶液a: 0.1g/mL氢氧化钠溶液,溶液b: 0.01g/mL硫酸铜溶液)
(2)步骤:向试管中加入2mL→样品溶液→加入1mL缩二脲试剂A,摇匀→加入4滴缩二脲试剂B,摇匀→观察颜色变化(紫色)
测试中心提示:
(1)常见的还原糖和非还原糖有哪些?
葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原糖。淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原糖。
(2)还原糖植株组织取样的条件是什么?
含糖量高,颜色为白色或接近白色,如苹果、梨、白菜叶、白萝卜等。
(3)为什么研磨时要加入石英砂?不加石英砂对实验有什么影响?
加入石英砂,研磨更彻底。没有石英砂,组织样品溶液中的还原糖会减少,鉴定时溶液颜色变化不明显。
(4)费林试剂A和B的溶液怎么用?混的目的?为什么现在混合使用?
混合后使用;生成氢氧化铜;氢氧化铜不稳定。
(5)还原糖加入费林试剂后,溶液颜色变化的顺序?
浅蓝色棕色砖红色。
(6)花生种子片为什么要薄?
只有非常薄的切片才能透射光,用于显微镜观察。
(7)旋转精细准焦螺旋时,如果花生切片中一部分细胞始终清晰,另一部分模糊,一般是什么原因?
切片厚度不均。
(8)乙醇在脂肪鉴定中的作用是什么?
洗掉浮色。
(9)缩二脲试剂A和B是否混合使用?先加溶液a的目的。如何通过对比看颜色变化?
不能混;加入溶液a的目的首先是使溶液呈碱性;留出一些大豆组织样本进行比较。
实验三:观察叶绿体和细胞质的流动
实验材料:新鲜苔藓叶、黑藻叶或菠菜叶,口腔上皮细胞临时包装。
实验原理:显微镜下观察叶绿体呈绿色、球形或椭球形。janus绿染色的口腔上皮细胞中的线粒体呈蓝绿色,细胞质几乎无色。
知识总结:选材,制作,低倍观察,高倍观察
测试中心提示:
(1)为什么可以直接用苔藓小叶代替菠菜叶?
因为苔藓的叶子很薄,只有一层细胞组成,而菠菜的叶子有很多层细胞组成。
(2)取菠菜叶下表皮时,为什么要取一些叶肉?
表皮细胞除保卫细胞外一般不含叶绿体,叶肉细胞含叶绿体较多。
(3)如何加快黑藻细胞质的流动?最佳温度是多少?
照明,提高水温,剪一些叶子;25℃左右。
(4)在哪里观察到黑藻的细胞,观察到的胞质流动现象最明显?
静脉附近的细胞。
(5)如果视野中细胞内的细胞质流动方向是顺时针方向,那么在加载中细胞内的细胞质实际流动方向是怎样的?
还是顺时针。
(6)是不是普通细胞的细胞质不流动,只有黑藻等少数植物的细胞质?
不,活细胞的细胞质是可移动的。
(7)如果观察植物根毛细胞中细胞质的流动,应该如何调节显微镜视野的亮度?
视野要适当调暗,反光镜的平面镜可以用来照明或缩小光圈。
(8)强光照射下,叶绿体的迎光面有什么变化?
叶绿体的受光面积小,一侧朝向光源。
实验4:观察有丝分裂
实验材料:洋葱根尖(洋葱、大蒜)
实验步骤:
(一)洋葱根尖的培养
(2)包装生产:解离→漂洗→染色→压片
1.解离:药液:质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的乙醇(1: 1混合溶液)。时间:3~5min。目的:分离细胞。
2.冲洗:用清水冲洗10分钟左右。目的:洗掉药液,防止过度解离,便于染色。
3.染色:用质量浓度为0.01克/毫升或0.02克/毫升的龙胆紫溶液(或品红醋酸溶液)染色3 ~ 5分钟。目的:对染色体进行染色观察。
4.制作:将根尖放在载玻片上,加一滴清水,用镊子折断根尖,用盖玻片覆盖,盖玻片上再加一张载玻片。然后用拇指轻轻按下滑块。目的:分散细胞,便于观察。
(3)观察
1.首先,在低倍显微镜下找到顶端分生组织中的细胞:细胞呈方形,排列紧密,部分细胞正在分裂。
2.高倍镜观察:中期→分裂前、分裂后、结束→间期。(注意各个时期染色体形态和分布的特点)。其中间期细胞数量最多。
测试中心提示:
(1)培养根尖为什么要经常换水?
增加水中氧气,防止无氧呼吸引起的根腐。
(2)培育根尖时,应该选择老葱还是新葱?为什么?
老葱要用,因为新葱还在休眠,不容易生根。
(3)为什么每根只能用根尖?什么时候生根尖最好?为什么?
因为顶端分生组织中的细胞可以进行有丝分裂;上午10: 00至下午2:00;因为此时细胞分裂活跃。
(4)解离和压片的目的是什么?为什么要在压片的时候再加一个载玻片?
解离是细胞间的分离,压片是细胞间的分离。再加一个载玻片的目的是为了均匀受力,防止盖玻片被压碎。
(5)如果观察到的组织细胞大多破碎不完整,是什么原因?
压片时用力过大。
(6)盐酸在解离过程中起什么作用?丙酮能代替吗?
细胞间物质的分解和溶解;不,硝酸可以代替。
(7)为什么要漂洗?
洗去盐酸便于染色。
(8)细胞中染色最深的结构是什么?
染色最多的结构是染色质或染色体。
(9)如果观察到的细胞都是紫色的,是什么原因?
染料浓度过高或染色时间过长。
(10)为什么要找子区域?分生组织区有什么特点?用高倍物镜能找到子午区吗?为什么?
因为只有分生组织区域的细胞才能在根尖分裂;分生组织区的特点是:细胞呈方形,排列紧密,部分细胞处于分裂状态;用高倍镜是找不到分生组织区域的,因为用高倍镜观察到的实际范围很小,很难找到分生组织区域。
(11)分生组织细胞中,哪个时期细胞最多?为什么?
区间;因为在细胞周期中,间隔时间最长。
(12)观察到的细胞能从中期变为后期吗?为什么?
不会,因为观察到的细胞都是停留在一定时期的死细胞。
(13)观察洋葱表皮细胞是否能看到染色体。为什么?
不会,因为洋葱表皮细胞一般不分裂。
(14)如果观察时看不到染色体,是什么原因?
未发现分生组织细胞。分裂阶段未发现细胞。染液太稀;染色时间太短。
实验5:色素的提取和分离
实验原理:
(1)叶绿体中的色素可溶于有机溶剂丙酮或无水乙醇提取色素
(2)各种颜料在色谱溶液中的溶解度不同,色谱溶液在滤纸上的扩散速度也不同——颜料的分离
实验步骤:
(1)提取色素并研磨
(2)制备滤纸条
(3)画出滤液的细线:均匀、直而细,并重复几次
(4)色素的分离:不要让滤液的细线接触色谱溶液
(5)观察记录:结果滤纸条从上到下依次为橙黄色(胡萝卜素)、黄色(叶黄素)、蓝绿色(叶绿素a)、黄绿色(叶绿素b)。
测试中心提示:
(1)对刀片的要求?为什么要去掉叶柄和粗时间脉?
绿色,最好是深绿色。因为叶柄和叶脉含色素很少。
(2)二氧化硅的作用是什么?不加二氧化硅对实验有什么影响?
为了充分研磨。没有二氧化硅,滤液和色素带的颜色会变浅。
(3)丙酮的作用是什么?能换成什么?水能代替吗?
溶解色素。可以用醇类等有机溶剂代替,但不能用水代替,因为色素不溶于水。
(4)碳酸钙的作用是什么?不加碳酸钙对实验有什么影响?
保护色素,防止叶绿体中的色素在研磨过程中受损。没有碳酸钙,滤液会变成黄绿色或棕色。
(5)为什么要快速打磨?足够吗?过滤时为什么用布代替滤纸?
研磨速度快,以防止丙酮大量挥发;只有通过充分研磨,才能将大量颜料溶解在丙酮中。颜料不能通过滤纸,但可以通过尼龙布。
(6)为什么滤纸条有两个角被切掉了?
防止两侧的层析液扩散过快。
(7)为什么不能用钢笔或圆珠笔画线?
因为钢笔水或圆珠笔油含有其他颜料,会影响颜料的分离效果。
(8)滤液的细线为什么要直?为什么要重画几次?
防止颜料带重叠;增加颜料量,使颜料带颜色变深。
(9)为什么滤液螺纹接触不到层析液?
防止颜料溶解到色谱溶液中。
(10)为什么滤纸条上的颜料会分离?
由于不同颜料在色谱溶液中的溶解度不同,不同颜料随色谱溶液在滤纸条上的扩散速度也不同。
(11)什么颜料的颜料带最宽?它在色谱溶液中的溶解度大于任何颜料。
最宽的色素带是叶绿素a,比叶绿素B更易溶解..
(12)滤纸条上相互距离最大的两种颜料是什么?
胡萝卜素和叶黄素。
(13)哪个色素带最窄?为什么?
第一个色素带,因为胡萝卜素是叶绿体中四种色素中最少的。
实验6:观察血浆壁的分离和恢复
实验条件:细胞内外溶液浓度差、活细胞、大液泡
实验材料:紫葱鳞片的外皮细胞(有紫色液泡)、质量浓度为0.3g/mL的蔗糖溶液、清水等。
实验步骤:使洋葱鳞片叶外表面的皮肤细胞暂时负载→观察→将蔗糖溶液滴在盖玻片一侧,用吸水纸吸引另一侧→观察(液泡由大变小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离)→将清水滴在盖玻片一侧,用吸水纸吸引另一侧→观察(血浆壁分离回收)
实验结论:细胞外液浓度>细胞内液浓度,细胞外液浓度对细胞脱水血浆壁分离
知识总结:制作、观察、加液、观察、加水、观察
测试中心提示:
(1)为什么选择紫葱?紫色太淡怎么办?
紫色洋葱有大的紫色液泡,便于观察液泡的大小变化;缩小光圈使视野变暗。
(2)洋葱皮应该撕开还是去皮?为什么?
表皮要撕开但不要切开,因为切开的表皮往往太厚。
(3)植物细胞为什么会有质壁分离?动物细胞会吗?
当细胞失水时,其原生质层的弹性大于细胞壁的弹性。动物细胞不经历质壁分离,因为动物细胞没有细胞壁。
(4)血浆壁分离时液泡大小和颜色的变化?恢复呢?
当细胞中发生质壁分离时,液泡变小,紫色加深。细胞壁分离修复后,液泡变大,紫色变浅。
(5)如果血浆壁分离后的细胞不能恢复,是什么原因?
细胞已经死亡(可能是外液浓度过高,细胞失水过多或血浆壁分离时间过长)
(6)使用大功率反射镜之前,负载是如何移动的?
如果你想把视野中的上图移到视野的中心,你应该继续把装载量上移。如果要把视野中的左像移到视野中心,就要继续把加载移到左边,因为你在显微镜视野中看到的是倒置的像。
(7)更换高倍率物镜后,如何使物像清晰?
视野的亮度会有怎样的变化?怎么减轻?更换大功率物镜后,要调整好细聚焦螺旋,使物像清晰;视野会变暗,通过调节大光圈或者使用反光镜的凹面镜,视野会变亮。
(8)目镜和物镜的长度与放大率的关系?
目镜越长,放大率越小。物镜越长,放大率越大。
(9)物体图像清晰后,物镜与载玻片的距离与放大率有什么关系?
物镜和载玻片之间的距离越小,放大倍数越大。
(10)如何计算总放大率?放大倍数特指面积或长度的放大倍数?
总放大率等于目镜放大率和物镜放大率的乘积。放大率是指小物体的长度或宽度的放大率。
(11)放大率与视野中细胞的大小和数量以及视野亮度之间的关系。
放大倍数越大,视野中的细胞数量越多,视野越暗。
(12)如何确定视野内发现异物的位置?
更换目镜,如果异物消失,异物在目镜上;更换物镜。如果异物消失,它会在物镜上并移动载玻片。如果异物移动,它会在载玻片上。
(13)如何利用血浆壁分离现象来确定植物细胞液的浓度?
(1)配制一系列浓度从小到大的蔗糖溶液
(2)用上述不同浓度的溶液临时装载植物细胞
③用显微镜观察植物细胞是否发生质壁分离。植物中细胞液的浓度介于不能引起质壁分离的浓度和能引起质壁分离的浓度之间。
实验七,探索酵母的呼吸方式
实验原理:
1、酵母在有氧条件下进行有氧呼吸,产生二氧化碳和水:
c6h 12o 6+6o 2+6h2o 6→CO2+12H2O+能量
2、无氧条件下的无氧呼吸,产生酒精和少量二氧化碳:
c6h 12o 6→2c 2h 5oh+2co 2+一点能量
实验检测:
(1)检测CO2的产生:使澄清的石灰水浑浊,或使溴百里酚蓝水溶液由蓝色变为绿色再变为黄色。
(2)酒精产生的检测:橙色重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精反应,变成灰绿色。
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