合成肽 小分子肽是怎么生产品的——活性肽生产方法大全

活性肽的生产方法

随着生物技术的发展，生产多肽的方法也在不断发展。生产小肽的方法有几种:提取法、酸碱法、酶法、合成法和基因法。

1)提取方法:

20世纪五六十年代，包括中国在内的世界上许多国家主要从动物器官中获取肽。例如，胸腺素是通过屠宰新生小牛，切断它们的胸腺，然后利用休克分离的生物技术休克分离小牛胸腺中的肽，从而制备胸腺素注射液。这种胸腺素广泛用于调节和增强人体免疫功能。

天然生物活性肽有很大的区别。自然界的动物、植物和海洋生物中含有丰富的生物活性肽，发挥各种生理功能，维持正常的生命活动。这些天然生物活性肽包括抗生素、激素等生物次生代谢产物，以及存在于各种组织系统中的活性肽。

目前，已经从人类、动物、植物、微生物和海洋生物中分离出许多生物活性肽。但生物体内生物活性肽的含量一般都是微量的，目前天然生物体内生物活性肽的共享和纯化过程并不完善，导致成本高，生物活性低；

多肽提取分离常用的方法有盐析沉淀、超滤、凝胶过滤、等电点沉淀、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、凝胶电泳等。但是它们的主要缺点是操作复杂和成本高。

2)酸碱法:

酸水解和碱水解多用于试验机构，很少用于本生产。蛋白质的碱性水解，丝氨酸和苏氨酸等氨基酸被破坏，外消旋化，营养成分损失大，所以这种方法很少用于生产；酸解水解蛋白不会引起氨基酸的外消旋化，水解速度快，反应完全，但其缺点是工艺复杂，难以控制，环境污染大，产生的多肽分子量分布不均匀，极不稳定，难以确定其生理功能

3)酶解:

大多数生物活性肽以非活性状态存在于蛋白质的长链中。当被特定的蛋白酶水解时，活性肽从蛋白质的氨基序列中释放出来。近几十年来，从动物、植物和海洋生物中酶解获得的生物肽一直是国内外研究的热点，从中分离出了多种具有免疫调节、抗氧化、抑菌、降血压、抗脂质和抗肿瘤等功能的生物活性肽。

酶法生产生物活性肽是通过选择合适的蛋白酶，以蛋白质为底物，获得大量具有多种生理功能的生物活性肽。在生产过程中，温度、PH值、酶浓度、底物浓度等因素与小肽酶解的生产效果密切相关，其中最关键的是酶的选择。酶解得到的多肽质量、分子量分布和氨基酸组成也因酶的不同、酶的选择和配方不同、蛋白质不同而有很大差异。通常人们选择胃蛋白酶、胰蛋白酶等动物蛋白酶，也可以使用菠萝、木瓜蛋白酶等植物蛋白酶。随着科学技术的发展和生物酶解技术的创新，许多酶将被不断发现和利用。

酶解技术成熟，投资少，已被广泛应用于生物活性肽的制备，如上海西商生物技术有限公司开发生产的低聚肽小分子大豆肽魏sqjkrx。

4)合成方法:

化学合成在合成50个氨基酸的多肽方面具有明显优势，极大地促进了多肽药物的发展。肽的化学合成方法主要分为液相法和固相法。液相合成主要在液体中进行，所以称为液相合成。合成有两种:分步合成和片段合成。对于由较少氨基酸组成的多肽，液相合成法速度快，纯度高，可大量合成。液相合成是一种经典的合成方法，具有保护基团选择多、成本低、合成易于放大等优点。自1963年梅里菲尔德成功发明固相合成肽以来，经过不断改进和完善，固相合成法已成为多肽和蛋白质工程中一项重要且常用的技术，显示出经典液相合成法不可比拟的优势。固相法是将待合成多肽一端的氨基酸的羧基、氨基或侧链基团连接到固体载体上，然后从氨基或羧基端逐渐生长肽链的方法。与液相法相比，固相法具有操作简单、自动操作的优点。

酶促合成是指蛋白酶催化合成肽。在活性肽的酶促合成中，最广泛使用的酶是丝氨酸和半胱氨酸内切酶。与化学合成相比，酶促合成具有条件温和、特异性强、区域选择性高、毒性低、无外消旋化等特点。酶促肽合成有其不可替代的优势，但反应周期长、生产效率低的缺点使其远远不能满足工业化生产的需要，酶促合成在实际生产中的应用仍然有限。

5)基因工程方法:

基因工程是指从动物、植物或海洋生物基因组中分离出带有目的基因的DNA片段，然后将DNA片段克隆到合适的载体中，通过特定的方法导入受体细胞，通过细胞表达或在噬菌体基因序列中插入外源基因获得所需的活性肽，使多肽以整合蛋白的形式表达，然后在噬菌体颗粒表面进行加工纯化。基因工程合成肽具有高表达、高产量、低成本的优点，可以获得高纯度、疗效好、具有天然活性的多肽药物。这种方法已用于生产多肽药物，如胸腺素、干扰素和白细胞介素。与化学合成相比，基因工程更适合制备长肽。